|
|
Genetická predispozice ke komplikacím jaterní cirhózy
Šenkeříková, Renáta ; Špičák, Julius (vedoucí práce) ; Brůha, Radan (oponent) ; Husová, Libuše (oponent)
Souhrn Jaterní cirhóza představuje konečné stadium většiny chronických jaterních chorob. Průběh onemocnění a jeho komplikace může být zásadně ovlivněn genetickými faktory hostitele a závažností portální hypertenze (PH). Cílem práce bylo popsat roli genetických faktorů ovlivňujících progresi a komplikace jaterního onemocnění a určit roli neinvazivního hodnocení stupně jaterní fibrózy a tíže PH a jejich korelaci s měřením portosystémového gradientu (HVPG). Nejprve jsme se zaměřili na roli alelických variant v genech TLR4 signální dráhy na rozvoj závažných bakteriálních infekcí u pacientů s pokročilou jaterní cirhózou, kandidátů transplantace jater (LT). Zjistili jsme, že promotorová varianta TNFA c.-238G/A významně snižuje riziko bakteriálních infekcí a mortalitu s nimi spojenou. Dále jsme ověřovali roli variantní alely G v genu PNPLA3 v progresi chronického jaterního selhání a nutnosti LT u pacientů s jaterní cirhózou při HCV infekci. Výsledem práce bylo zjištění, že nosičství variantní alely G vedlo k rychlejší progresi chronického jaterního selhání a nutnosti LT v mladším věku. Za třetí jsme se zabývali otázkou, zda účinnost trojkombinační léčby HCV infekce pomocí pegylovaného interferonu alfa, ribavirinu a proteázového inhibitoru první generace závisí na expresním profilu interferon- senzitivních genů...
|
|
|
Fanconiho anémie a karcinom pakreatu
Hucl, Tomáš ; Špičák, Julius (vedoucí práce) ; Nečas, Emanuel (oponent) ; Vodička, Pavel (oponent)
K inaktivaci genů signální dráhy Fanconiho anémie (FA) dochází v řadě lidských nádorů včetně karcinomu pankreatu a způsobuje jejich citlivost k látkám tvořícím meziřetězcové můstky (interstrand-cross- linking agents, ICL). Snaha specificky léčit pankreatické a jiné nádory s FA mutacemi vzbudila v poslední době velký zájem, nicméně preklinické studie byly doposud limitovány nedostatkem vhodných lidských dobře kontrolovatelných buněčných modelů. Endogenně jsme přerušili geny FANCC a FANCG v buněčné adenokarcinomové linii a pozorovali fenotyp typický pro deficit FA signální dráhy (ztráta FANCD2 monoubiquitinace, chromosomální nestabilita, zástava buněčného cyklu v G2M a snížená proliferaci při expozici ICL, spontánní zlomeniny chromosomů). Homozygotní přerušení bylo možné pro FANCC a FANCG, ale ne pro FANCD2 a BRCA2 v buněčné linii RKO, což může svědčit pro zhoubný fenotyp při jejich deficitu. Tato skutečnost podporuje paradoxní předpoklad, že jejich inaktivace může být nádorovými buňkami nepreferována. Za pomoci vysokokapacitního skríningu jsme posuzovali růst našich isogenních FANCC a FANCG buněk po expozici 880 léčivům a 40 000 různorodým chemickým látkám. Látka vykazující největší efekt, nazvaná 80136342, měla odlišný mechanismus účinku než ICL. Když byla podána společně s ICL, měla přinejmenším aditivní...
|
|
|
Clinical and genetic predictors of drug dependency in inflammatory bowel disease
Ďuricová, Dana ; Lukáš, Milan (vedoucí práce) ; Keil, Radan (oponent) ; Špičák, Julius (oponent)
IN CZECH Léková závislost (dependence) jako specifický fenotyp idiopatických střevních zánětů (IBD), Crohnovy nemoci (CN) a ulcerózní kolitidy (UC), předurčuje prognózu onemocnění. Může být proto využit jako důležitý prognostický ukazatel při volbě optimálního terapeutického postupu. Dependence je dobře popsaná u IBD pacientů léčených kortikosteroidy a recentně byla také potvrzena u nemocných léčených infliximabem (IFX dependence). Cílem této práce bylo: 1) zhodnotit výskyt IFX dependence u dětských a dospělých pacientů s CN; dále identifikovat klinické a genetické prediktory odpovědi na IFX a zhodnotit vliv IFX dependence na frekvenci operací; 2) zhodnotit u pacientů s CN výsledky 5-ASA monoterapie s ohledem na výskyt 5-ASA dependence a identifikovat klinické prediktory odpovědi na 5- ASA. Zjistili jsme, že 66% dětských a 29% dospělých pacientů s CN se stalo IFX dependentními. Vysoká frekvence u dětí je v souladu s dříve publikovanými prácemi, zatímco naše výsledky naznačují nižší výskyt IFX dependence u dospělé populace. Perianální onemocnění a nepřítomnost střevní operace před zahájením IFX byly identifikovány jako prediktory pro vznik IFX dependence u dětí. U dospělých pacientů, 2 genetické varianty LTA c.207 A>G a CASP9 c.93 C>T byli asociovány s IFX odpovědí. Dětští i dospělí pacienti se...
|
|
|
Patofyziologie kolorektálního karcinomu. Efekt screeningu kolorektálního karcinomu a role microRNA v patofyziologii kolorektálního karcinomu.
Král, Jan ; Špičák, Julius (vedoucí práce) ; Keil, Radan (oponent) ; Mohelníková Duchoňová, Beatrice (oponent)
Kolorektální karcinom (KRK) je závažné zhoubné nádorové onemocnění tlustého střeva, kterým celosvětově onemocní téměř dva miliony pacientů za rok. V České republice (ČR) je diagnostikován ročně u okolo osmi tisíc pacientů a přes tři a půl tisíce pacientů ročně na toto onemocnění umírá. Velká část je stále diagnostikována v pokročilém stadiu onemocnění (stadium IV - 20,1 %; stadium III - 24,5 % v roce 2017), což znamená horší celkovou prognózu. Screeningový program si klade za cíl identifikovat pacienty v časném stadiu KRK (stadium 0, I a II), kteří mají celkově lepší prognózu než ti s již vyvinutými symptomy onemocnění. Současný výzkum je zaměřen na markery, které by sloužily jak k časné diagnóze tohoto onemocnění, tak k predikci účinnosti léčby či časné recidivy nádoru. Prvním cílem naší práce bylo zhodnotit klinicko-patologickou charakteristiku pacientů s KRK diagnostikovaných screeningem v porovnání se symptomatickými pacienty a ověřit efektivitu screeningového programu v ČR. Provedli jsme multicentrickou prospektivní observační studii ve 12 centrech, která měla za cíl lépe charakterizovat jednotlivé parametry pacientů s KRK (lokalizace a stupeň diferenciace tumoru, výskyt metastáz apod). Screening byl definován jako primární screeningová koloskopie, nebo koloskopie po pozitivním testu na...
|
|
|
Kolorektální karcinom - od patogeneze ke screeningu. Kolorektální karcinogeneze u ulcerózní kolitidy s primární sklerózující cholangitidou a problematika screeningu kolorektálního karcinomu.
Wohl, Pavel ; Špičák, Julius (vedoucí práce) ; Škarda, Jozef (oponent) ; Gregor, Martin (oponent)
SOUHRN Kolorektální karcinom (KRCA) je ve většině civilizovaných zemí na předním místě mortality a morbidity. Disertační práce je zaměřena na vybrané aspekty patogeneze kolorektálního karcinomu a problematiku jeho screeningu. Cílem první studie bylo zhodnocení exprese slizničních markerů kolorektální karcinogeneze u ulcerózní kolitidy (p53, COX-2, bcl-2). Do studie byli zařazeni nemocní s aktivní ulcerózní kolitidou (UCA), ulcerózní kolitidou v remisi (UCR), primární sklerózující cholangitidou se současnou přítomností UC (PSC-UC), nemocní po transplantaci jater pro PSC (OLT) a kontrolní soubor (N). Zjistili jsme významně zvýšenou expresi p53 v nedysplastické sliznici u PSC- UC ve srovnání s UCA, OLT, UCR a N, což může být známkou vyššího neoplastického potenciálu PSC. Statisticky významná korelace byla zjištěna mezi přítomností PSC a expresí p53. Skupina OLT na rozdíl od PSC-UC překvapivě nevykazovala žádnou expresi p53 v nedysplastické sliznici. Patogeneticky se PSC může podílet na zvýšené expresi p53. Zmíněný nález by mohl podporovat hypotézu založenou na možném patofyziologickém vlivu jater/PSC na p53-indukované kolorektální karcinogenezi. Dále konstatujeme, že námi nalezená korelace exprese COX-2 a p53, stejně jako zvýšená exprese bcl-2 u UCA proti N mohou podporovat vliv zánětu v procesu kolorektální...
|
|
| |
|
|
Clinical and genetic predictors of drug dependency in inflammatory bowel disease
Ďuricová, Dana ; Lukáš, Milan (vedoucí práce) ; Keil, Radan (oponent) ; Špičák, Julius (oponent)
IN CZECH Léková závislost (dependence) jako specifický fenotyp idiopatických střevních zánětů (IBD), Crohnovy nemoci (CN) a ulcerózní kolitidy (UC), předurčuje prognózu onemocnění. Může být proto využit jako důležitý prognostický ukazatel při volbě optimálního terapeutického postupu. Dependence je dobře popsaná u IBD pacientů léčených kortikosteroidy a recentně byla také potvrzena u nemocných léčených infliximabem (IFX dependence). Cílem této práce bylo: 1) zhodnotit výskyt IFX dependence u dětských a dospělých pacientů s CN; dále identifikovat klinické a genetické prediktory odpovědi na IFX a zhodnotit vliv IFX dependence na frekvenci operací; 2) zhodnotit u pacientů s CN výsledky 5-ASA monoterapie s ohledem na výskyt 5-ASA dependence a identifikovat klinické prediktory odpovědi na 5- ASA. Zjistili jsme, že 66% dětských a 29% dospělých pacientů s CN se stalo IFX dependentními. Vysoká frekvence u dětí je v souladu s dříve publikovanými prácemi, zatímco naše výsledky naznačují nižší výskyt IFX dependence u dospělé populace. Perianální onemocnění a nepřítomnost střevní operace před zahájením IFX byly identifikovány jako prediktory pro vznik IFX dependence u dětí. U dospělých pacientů, 2 genetické varianty LTA c.207 A>G a CASP9 c.93 C>T byli asociovány s IFX odpovědí. Dětští i dospělí pacienti se...
|
|
|
Fanconiho anémie a karcinom pakreatu
Hucl, Tomáš ; Špičák, Julius (vedoucí práce) ; Nečas, Emanuel (oponent) ; Vodička, Pavel (oponent)
K inaktivaci genů signální dráhy Fanconiho anémie (FA) dochází v řadě lidských nádorů včetně karcinomu pankreatu a způsobuje jejich citlivost k látkám tvořícím meziřetězcové můstky (interstrand-cross- linking agents, ICL). Snaha specificky léčit pankreatické a jiné nádory s FA mutacemi vzbudila v poslední době velký zájem, nicméně preklinické studie byly doposud limitovány nedostatkem vhodných lidských dobře kontrolovatelných buněčných modelů. Endogenně jsme přerušili geny FANCC a FANCG v buněčné adenokarcinomové linii a pozorovali fenotyp typický pro deficit FA signální dráhy (ztráta FANCD2 monoubiquitinace, chromosomální nestabilita, zástava buněčného cyklu v G2M a snížená proliferaci při expozici ICL, spontánní zlomeniny chromosomů). Homozygotní přerušení bylo možné pro FANCC a FANCG, ale ne pro FANCD2 a BRCA2 v buněčné linii RKO, což může svědčit pro zhoubný fenotyp při jejich deficitu. Tato skutečnost podporuje paradoxní předpoklad, že jejich inaktivace může být nádorovými buňkami nepreferována. Za pomoci vysokokapacitního skríningu jsme posuzovali růst našich isogenních FANCC a FANCG buněk po expozici 880 léčivům a 40 000 různorodým chemickým látkám. Látka vykazující největší efekt, nazvaná 80136342, měla odlišný mechanismus účinku než ICL. Když byla podána společně s ICL, měla přinejmenším aditivní...
|
|
|
Účast některých mechanismů slizniční imunity v patogeneze Crohnovy choroby a ulcerózní kolitidy
Drastich, Pavel ; Špičák, Julius (vedoucí práce) ; Prokešová, Ludmila (oponent) ; Nečas, Emanuel (oponent)
V naší práci jsme přispěli k pochopení účasti některých mechanismů slizniční imunity v patogenezi Crohnovy choroby a ulcerózní kolitidy. Prokázali jsme, že zvýšená exprese TLR2, TLR4 a CD14 u pacientů s ulcerózní kolitidou a Crohnovou chorobou je následkem interakce střevních epitelových buněk a makrofágů v oblasti lamina propria se střevní mikroflórou. Signifikantně zvýšená TLR2 exprese v terminálním ileu u pacientů s ulcerózní kolitidou s aktivním průběhem onemocnění i v remisi bez průkazu slizničních zánětlivých změn pak může být projevem aktivace přirozeného imunitního systému. Hypoteticky pak slizniční imunitní systém citlivě reagující na potencionálně patogenní složku střevní mikroflóry způsobí narušení homestázy ve vzdálenějších úsecích střeva, jako je například kolonická sliznice. V další studii jsme prokázali, že slizniční produkce interleukinu-6 a jeho exprese na úrovní mRNA je rozdílná v různých částech střeva u pacientů s IBD i bez zjevné závislosti na makropicky prokazatelném zánětu. Toto pozorování může přispět k lepší identifikaci nemocných vhodných k léčbě humanizovanou monoklonální protilátkou proti receptorům IL-6 (MRA). Pilotní studie zaměřená na galektin-3 prokázala signifikantně zvýšenou koncentraci Gal-3 v séru nemocných s ulcerózní kolitidou i Crohnovou chorobou v aktivním stádiu...
|
|
| |
host ::
RSS.