|
|
New technique on a chip for rapid detection of biological materials
Pejović Simeunović, Jelena ; Foret,, František (referee) ; Táborský,, Petr (referee) ; Hubálek, Jaromír (advisor)
Tato práce navrhuje techniku separace a detekce na čipu pro kvantové tečky (QD, „quantum dots“) konjugované s různými proteiny, za účelem sledování vlivu vazebného činidla na potlačení intenzity uorescence QD způsobené konjugací s proteinem a za účelem provedení multianalytické imunoanalýzy k identifikaci malých množství daného proteinu. Za optimálních podmínek byly biokonjugované QD úspěšně odděleny od těch nezkonjugovaných během 10 minut. Částice a cílové roztoky byly smíchány a detekce na čipu byla provedena za pomoci zařízení vyvinutého v naší laboratoři. Byl použit pouze jeden zdroj excitačního světla v kombinaci s několika filtry pro různé emisní vlnové délky. Fluorescence emitovaná dvěma typy konjugovaných QD mohla být poté zaznamenána současně, protože QD emitovaly světlo na různých vlnových délkách, ačkoliv byly excitovány při stejné vlnové délce. Smícháním dvou typů QD biokonjugovaných se dvěma druhy proteinů a protilátek jsme dokázali detekovat imunokomplexní píky s různými plochami. Plocha pod píkem závisela na koncentraci QD a antigenů, na postupu reakcí protilátka–antigen a ukázalo se, že je lineárně korelována s koncentrací antigenu. Ukázali jsme, že kapilární elektroforéza QD na čipu může být použita jako citlivá technika pro detekci biologických molekul. Hlavními výhodami této metody jsou jednoduchost, malé požadavky na objem vzorku i činidla a také vysoká účinnost separace.
|
|
|
Protein-nanodiamond conjugates: the preparation and characterization
Šlegerová, Jitka ; Konvalinka, Jan (advisor) ; Vaněk, Ondřej (referee)
Nanodiamonds represent a member of vast group of carbon nanomaterials. They are characterized by chemical stability, biocompatibility, low toxicity and possibility of surface chemical modification that enables further conjugation of biomolecules, namely proteins. The most important property of nanodiamonds is easily detectable fluorescence resistant towards photobleaching. This luminescence is produced by so called (N-V) centers that can be formed by irradiation of nanodiamonds using high energy beams. Fluorescence of nanodiamonds is useful for construction of fluorescent labels and probes, cellular targeting and internalization, controlled drug delivery as well as enzyme immobilization. Two main connection modes are suitable for biomolecules' attachment: non-covalent and covalent. The first one has been utilized for decoration of nanodiamonds by various proteins, e.g. lysozyme, cytochrome c, neurotoxin or antigen. The second possibility has been demonstrated also on various proteins and, furthermore, on glycoproteins, oligonucleotides, vitamins or growth factor. During the immobilization of biomolecule on the nanoparticle surface it is crucial to keep its function, for example the catalytic activity in enzymes. For such purposes, the oxime ligation (connection of aldehyde presented on biomolecule...
|
|
|
Quantum dots and their interaction with biomolecules
Stanisavljević, Maja
In this study CdTe QDs were synthetized via microwave irradiation method. Further they have been modified for purposes of their interaction with biomolecules using different conjugation approaches. Applied conjugation chemistries were non-specific interaction, streptavidin-biotin affinity. Glutathione modified CdTe QDs of 2 nm size were capable of non-specific interaction with major groove of DNA, while streptavidin modified CdTe QDs served as specific linker for biotinylated oligonucleotides. Further, streptavidin-biotin interaction was used for coupling of apoferritin and magnetic nanoparticles.
|
guest ::
