Original title:
Elektroforetické stanovení aminokyselin v detritu
Translated title:
Electrophoretic determination of amino acids in detritus
Authors:
Smetanová, Aneta ; Křížek, Tomáš (advisor) ; Sobotníková, Jana (referee) Document type: Bachelor's theses
Year:
2025
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Tato bakalářská práce se zabývá stanovením aminokyselin v detritu pomocí kapilární elektroforézy s laserem indukovanou fluorescenční detekcí. Postup analýzy byl převzat a upraven na základě publikovaných metod. Aminokyseliny byly derivatizovány činidlem 3-(2-furoyl)chinolin-2-karboxyaldehyd a následně analyzovány za optimalizovaných podmínek. Separace byla prováděna v základním elektrolytu tvořeném 20 mmol dm−3 tetraboritanem disodným s 20 mmol dm−3 SDS při pH 9,2. Jako inertní standard byl použit L-norleucin. Metodou bylo možné stanovit třináct aminokyselin: Gln, His, Asn, Tyr, Gly, Glu, Asp, Ala, Ser, Thr, Val, Phe a Leu. Byla hodnocena opakovatelnost metody. Hodnoty relativní směrodatné odchylky migračních časů se pohybovaly do 2 %, u ploch píků byly mezi 1,7-7,9 % pro koncentraci 0,1 mmol dm−3 , pro koncentraci 0,01 mmol dm−3 byla relativní směrodatná odchylka migračních časů o něco vyšší do 6,5 % a pro plochy píků se hodnota pohybovala mezi 3,4 a 14,2 %. Mez detekce se pohybovala v rozmezí 0,42-29 µmol dm−3 a mez stanovitelnosti byl mezi 1,4-97 µmol dm−3 . Metoda byla aplikována na tři reálné vzorky detritu, ve kterých byla identifikováno šest až deset AMK. Konkrétně se podařilo stanovit Gln, His, Asn, Tyr, Gly, Glu, Asp, Ala, Ser, Phe a Leu, přičemž největší zastoupení měly aminokyseliny Glu,...This bachelor thesis deals with the determination of amino acids in detritus by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection. The analysis procedure was adopted and modified based on published methods. Amino acids were derivatized with the 3-(2-furoyl)quinoline-2-carboxyaldehyde reagent and subsequently analyzed under optimized conditions. The separation was carried out in background electrolyte consisting of 20 mmol dm-3 disodium tetraborate with 20 mmol dm-3 SDS at pH 9.2. The internal standard used was L-norleucine. Thirteen amino acids could be quantified by the method: Gln, His, Asn, Tyr, Gly, Glu, Asp, Ala, Ser, Thr, Val, Phe, and Leu. The repeatability of the method was evaluated. Relative standard deviations were below 2 % for migration times and between 1.7-7.9 % for peak areas at the 0.1 mmol dm−3 concentration level. For the 0.01 mmol dm−3 concentration level, the relative standard deviations of migration times were slightly higher, up to 6.5 %, and for peak areas they ranged between 3,4 and 14,2 %. Limits of detection ranged from 0.42-29 µmol dm-3 and limits of quantitation were between 1.4-97 µmol dm-3 . The method was applied to three real detritus samples in which six to ten amino acids were identified. Specifically, Gln, His, Asn, Tyr, Gly, Glu, Asp, Ala, Ser,...
Keywords:
amino acids; capillary electrophoresis; derivatization; detection; detritus; laser-induced fluorescence; aminokyseliny; derivatizace; detrit; kapilární elektroforéza; laserem indukovaná fluorescenční detekce
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/203607