Název:
Vývoj analytické metody pro studium významu hydrazonových metabolitů při intoxikaci izoniazidem II.
Překlad názvu:
Bioanalytical method development for the investigation of the role of pyridoxal isonicotinoyl hydrazone in isoniazid intoxication II.
Autoři:
Charvátová, Jana ; Vrbatová, Ivana (vedoucí práce) ; Pilařová, Pavla (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2011
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Diplomová práce Abstrakt 51 Abstrakt Vývoj analytické metody pro studium významu hydrazonových metabolitů při intoxikaci izoniazidem II. Jana Charvátová Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Heyrovského 1203, 500 05 Hradec Králové Klíčová slova: izoniazid, vitamín B6, hydrazon, hydrofilní interakční chromatografie Byla vyvinuta HPLC/UV metoda umožňující separaci izoniazidu - INH, jeho hlavního metabolitu (acetylizoniazid - AcINH) a potenciálních metabolitů (pyridoxal isonikotinoyl hydrazon - PIH, pyridoxal isonikotinoyl hydrazon-5-fosfát - PIH5P), vitamínů B6 (pyridoxin - PN, pyridoxal - PL a pyridoxal-5-fosfát - PLP) za užití ZIC-pHILIC stacionární fáze. Pro zjištění vlivu na retenci daných látek byly optimalizovány následující parametry: složení mobilní fáze, procentuální zastoupení organické fáze, síla a pH pufru, průtok mobilní fáze a teplota kolony. Nejlepší dostupné separace bylo dosaženo za použití 10mM mravenčanu amonného (pH 3) a ACN (40:60, v/v) při průtoku 0,10 ml/min a teplotě kolony 25 řC. Vyvinuté podmínky byly následně úspěšně použity při HPLC/ESI/MS analýze. Experimentálně bylo zjištěno, že nejintenzivnějším iontem ve spektru u všech analytů jsou protonované molekuly v pozitivním módu [M+H]+ . Analyty byly hodnoceny v...Diploma thesis Abstract 52 Abstract Bioanalytical method development for the investigation of role of pyridoxal isonicotinoyl hydrazone in isoniazid intoxication II. Jana Charvátová Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Control Heyrovského 1203, 500 05 Hradec Králové Keywords: isoniazid, vitamin B6, hydrazone, hydrophilic interaction chromatography HPLC/UV method was developed for analysis of isoniazid - INH, its main (acetylisoniazid - AcINH) and putative metabolites (pyridoxal isonicotinoyl hydrazone - PIH, pyridoxal isonikotinoyl hydrazone 5-phosphate - PIH5P), vitamins B6 (pyridoxine - PN, pyridoxal - PL and pyridoxal 5-phosphate - PLP) using ZIC-pHILIC stationary phase. The following parameters were modified to assess their impact on the retention of these compounds: composition of mobile phase, percentage content of organic solvent, buffer concentration, pH, flow rate of mobile phase and column temperature. The best available separation of the compounds was achieved using 10mM ammonium formate (pH 3) and ACN (40:60, v/v), flow rate 0.10 ml/min and column temperature 25 řC. Developed method was transferred to HPLC/ESI/MS. Experiments revealed that all analytes gave the higher signal in positive mode and the most abundant ions...