Original title:
Vývoj inovativního biosenzoru pro elektrochemickou detekci tumor supresorového genu TP53
Authors:
Navrátil, Jiří Document type: Master’s theses
Year:
2019
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Diplomová práce se ve své teoretické části zabývá nádorovými onemocněními a obecným popisem tumor supresorových genů. Zvláštní pozornost je věnována genu TP53 a jeho vlivu na fungování organismu, včetně jeho produkce proteinu p53. Na základě analýzy a syntézy poznatků z odborných zdrojů byly popsány současné metody detekce uvedeného genu a to zejména imunologické a elektrochemické. Poslední kapi-tola teoretické části je věnována biosenzorům a jejich rozdělení se zvláštním zřetelem na biosenzory elektrochemické. Praktická část se zabývá konstrukcí a optimalizací biosenzoru od čištění elektrod, přes deponaci zlatých nanočástic, vazbu ssDNA, blokování volných vazebných míst, syntézu komplementárního řetězce až po výsledné měření a testování kvality. Předsta-ven je rovněž koncept inovativního biosenzoru, který nabízí jednodušší a spolehlivější alternativu při detekci genu TP53. V poslední kapitole této části jsou pak výše zmíněné výsledky zanalyzovány a komentovány.The theoretical part of the diploma thesis deals with tumour diseases and a general description of tumour suppressor genes. Special attention is paid to the TP53 gene and its influence on the functioning of the organism, including its production of the p53 protein. Based on an analysis and synthesis of findings from specialised sources, the current methods of detecting the aforesaid gene, in particular immunological and elec-trochemical, were described. The last chapter of the theoretical part is devoted to bio-sensors and their classification, with a special focus on electrochemical biosensors. The practical part involves the construction and optimisation of the biosensor, from the cleaning of electrodes, the deposition of gold nanoparticles, the ssDNA bond, the blocking of free binding points and a synthesis of the complementary chain to the resulting measurement and quality testing. This part also presents the concept of an innovative biosensor that offers an easier and more reliable alternative for the detec-tion of the TP53 gene. The last chapter of this part analyses and comments on the aforesaid results.
Keywords:
biosenzor; p53; rakovina; TP53; tumor supresorový gen