Název:
Srovnání citlivosti bezkontaktní vodivostní detekce a přímé UV detekce při elektroforetickém stanovení N-acetylaminosacharidů
Překlad názvu:
Comparison of contactless conductivity detection and direct UV detection sensitivity for electrophoretic determination of N-acetylaminosaccharides
Autoři:
Malý, Michal ; Křížek, Tomáš (vedoucí práce) ; Kozlík, Petr (oponent) Typ dokumentu: Bakalářské práce
Rok:
2014
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Tato práce se zabývá vývojem a optimalizací metody separace N-acetylglukosaminu a jeho dimeru a tri- meru kapilární zónovou elektroforézou s využitím bezkontaktní vodivostní detekce. Bylo zjištěno, že sepa- race a detekce těchto látek je možná, pokud je jako pracovní elektrolyt použit hydroxid sodný, použití jiných elektrolytů jako hydrogenfosforečnanu sodného mělo za následek nepřijatelně vysoký šum základní linie. Optimální podmínky pro provedení separace byly při koncentraci pracovního elektrolytu 40 mmol dm−3 a pracovním napětí 15 kV. Metoda je velmi citlivá na pH pracovního elektrolytu a použitý pracovní elektrolyt způsobuje rychlou degradaci kapiláry. Z těchto důvodů je obtížné spolehlivě provést kalibraci. Vyvinutá metoda byla porovnána s již existující metodou pro separaci těchto analytů využívající UV detekci. Exis- tující metoda má v porovnání s vyvinutou metodou nižší meze detekce a stanovitelnosti a je méně citlivá na pracovní podmínky. Meze detekce a stanovitelnosti vyvinuté metody jsou 34 µmol dm−3 , respektive 104 µmol dm−3 , meze detekce a stanovitelnosti metody využívající UV detekci jsou 7 µmol dm−3 , respek- tive 21 µmol dm−3 . Uvedené meze stanovitelnosti jsou uvedeny pro analyt, pro který byla detekce nejméně citlivá, v obou případech šlo o dimer. Výhodou vyvinuté metody proti...is work deals with development and optimization of a method for separation and detection of N- acetylglucosamine and its dimer and trimer using capillary zone electrophoresis with contactless conductiv- ity detection. Separation and detection of these substances is possible if sodium hydroxide is used as back- ground electrolyte. Usage of another electrolyte such as disodium phosphate leads to unacceptable baseline noise level. Optimal conditions of this method are a background electrolyte concentration of 40 mmol dm−3 and voltage of 15 kV. e method is very sensitive to background electrolyte pH, used background electrolyte also causes rapid degradation of the inner capillary wall which is why this method has proven difficult to cali- brate properly. e developed method was compared to an already existing method which uses UV detection. e existing method has lower limits of detection and quantification and is less sensitive to working condi- tions. Limits of detection and quantification of the developed method are 34 µmol dm−3 and 104 µmol dm−3 respectively. Limits of detection and quantification of the method based on UV detection are 7 µmol dm−3 and 21 µmol dm−3 respectively. Limits of quantification are that of the analyte whose detection was the least sensitive which was the dimer in both...
Klíčová slova:
bezkontaktní vodivostní detekce; enzymová kinetika; kapilární elektroforéza; capillary electrophoresis; contactless conductivity detection; enzyme kinetics