Original title:
In vivo imaging of cell interior using automated high-resolution cytometry
Translated title:
Využití vysokorozlišovací cytometrie ke studiu živých buněk
Authors:
Vařecha, M. ; Amrichová, J. ; Ondřej, Vladan ; Lukášová, Emilie ; Kozubek, Stanislav ; Matula, Pa. ; Matula, Pe. ; Kozubek, Michal Document type: Papers Conference/Event: Biophysics of the Genome, Brno (CZ), 2004-10-12 / 2004-10-13
Year:
2004
Language:
eng Abstract:
[eng][cze] The fluorescent proteins are important innovation in the field of cell biology and in vivo experiments that use fluorescent proteins bring new interesting results from a different point of view than in vitro and in situ experiments. This presentation will introduce our automated 2D/3D high-resolution time-lapse image acquisition and analysis of living cells transfected with plasmids encoding fusion proteins or dyed with fluorescence probes. One of our in vivo projects, we will mention, is focused on the study of mitochondrial and nuclear apoptotic processes in living cells. Another in vivo project concentrates on the study of topography of telomeres and incidence of telomere-association phenomenon in various types of human tumor and healthy cells. In our experiments, cells are stably or transiently transfected with plasmid DNAs coding mitochondrial apoptogenic or telomere-binding proteins with fluorescent proteins.Použití fluorescenčních proteinů v buněčné biologii přináší nové poznatky často odlišné od experimentů dosud prováděných pouze in situ. Tato práce představuje metodu studia živých buněk v čase ve 2D i 3D pomocí vysokorozlišovací cytometrie, popisuje také snímání obrazových dat i jejich analýzu. Jako vzorky byly použity živé buňky, jak geneticky obohacené o geny kódující fúzní fluorescenční proteiny, tak obarvené fluorescenčními sondami vhodnými pro živé buňky. Jeden z našich projektů se soustřeďuje na studium mitochondriálních a jaderných apoptotických procesů v živých buňkách a druhý projekt se zabývá studiem topographie telomer a četností telomerických asociací v různých typech lidských nádorových a zdravých buněk. V našich experimentech používáme buňky, které jsou stabilně nebo tranzientně transfekovány plazmidovou DNA kódující mitochondriální apoptotické nebo na telomery se vázající proteiny s připojenými fluorescenčními proteiny.
Keywords:
fluorescent proteins; high-resolution cytometry; in vivo experiments Project no.: CEZ:AV0Z5004920 (CEP), GP204/03/D031 (CEP), GA202/04/0907 (CEP), IAA1065203 (CEP) Funding provider: GA ČR, GA ČR, GA AV ČR Host item entry: Biophysics of the Genome: Proceedings of the Workshop Held at Brno, ISBN 80-210-3560-9
Institution: Institute of Biophysics AS ČR
(web)
Document availability information: Fulltext is available at the institute of the Academy of Sciences. Original record: http://hdl.handle.net/11104/0015610