|
|
Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení účinných látek a nečistoty v přípravku Valetol
Maroušková, Alena ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Tato práce navazuje na diplomovou práci (1) , ve které byly nalezeny optimální chromatografické podmínky pro stanovení účinných látek léčivého přípravku Valetol, paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu, a nečistoty p-aminofenolu, metodou HPLC. Součástí rigorózní práce bylo nalezení vhodného vnitřního standardu pro přesnou kvantifikaci účinných látek a nečistoty, kyseliny benzoové. Následně byla provedena validace analytické metody, včetně testu vhodnosti chromatografického systému. V rámci testu vhodnosti chromatografického systému byla testována: účinnost kolony vyjádřená počtem teoretických pater N asymetrie chromatografických píků vyjádřená faktorem T rozlišení chromatografických píků opakovatelnost vyjádřená relativní směrodatnou odchylkou V rámci validace analytické metody byla testována: přesnost linearita správnost selektivita robustnost stabilita Test robustnosti prokázal citlivost analýzy na změnu složení mobilní fáze. Byly testovány dva parametry mobilní fáze: pH a změna obsahu triethylaminu. Bylo dokázáno, že změna pH mobilní fáze má vliv především na retenční časy p-aminofenolu a kyseliny benzoové. Změna obsahu triethylaminu v mobilní fázi má výrazný vliv jak na retenční čas p-aminofenolu, tak na velikost plochy píku p-aminofenolu (na jeho kvantifikaci). Požadavek na...
|
|
|
Monitorování liberačních testů.
Beran, Marek ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Marek Beran Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Konzultant: Ing. Daniela Šmejkalová, Ph.D Název diplomové práce: Monitorování liberačních testů. Diplomová práce je zaměřena na vývoj automatizované metody pro monitorování disolučního profilu klotrimazolu z topických lékových forem. Je zde porovnáván disoluční profil přípravků obsahujících antimykotikum klotrimazol. A to komerčně dostupných léčivých přípravků Canesten a Clotrimazol AL ve formě krémů, které jsou porovnávány s novou formulací od firmy Contipro a.s. zvanou Delcore, obsahující komplexní matrici. V teoretické části práce je pojednáno o mykotických infekcích se zaměřením na povrchové mykózy a o přípravcích, dostupných na Českém trhu, určených pro léčbu těchto infekcí. Dále se v práci nachází popis vybraných neseparačních průtokových analytických metod. Analýza probíhala v systému sekvenční injekční analýzy, se třemi připojenými Franzovými disolučními celami s membránou, na níž byla nanesena látka, u které byl sledován disoluční profil. Franzovy cely byly umístěny do vodní lázně o teplotě 32 řC. Jako disoluční prostředí byl zvolen fosfátový pufr s pH 7,4 pro částečnou imitaci lidského prostředí. Detekce byla provedena UV detektorem při...
|
|
|
Optimalizace HPLC stanovení klotrimazolu
Žáková, Petra ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Byla vypracována metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) pro stanovení obsahu účinné látky klotrimazolu a příslušných nečistot (2-chlorfenyl)difenylmethanolu a imidazolu v přípravku Clotrimazol spray 1 %. Předložená práce byla zaměřena na výběr vhodné chromatografické kolony, složení mobilní fáze, jejího pH a vnitřního standardu pro analýzu léčivého přípravku obsahujícího lokálně užívané antimykotikum klotrimazol. Celkem bylo testováno 7 chromatografických kolon. Testované kolony: Discovery HS F5 (5 μm, 150 x 4,6 mm); Chromolith® Performance, RP-18e (100 x 3 mm); ZIC® HILIC (3,5 μm, 50 x 2,1 mm); XTerra® RP 18 (5 μm, 100 x 3 mm); Discovery RP Amide C 16 (5 μm, 250 x 3 mm); Zorbax Extend-C18 (3,5 μm, 75 x 4,6 mm); Discovery ZR-PBD (5 μm, 150 x 4,6 mm). Jako optimální kolona byla zvolena Discovery ZR-PBD (5 μm, 150 x 4,6 mm). Tato kolona je na bázi oxidu zirkoničitého, který je potažený vrstvou polybutadienu. Oxid zirkoničitý je stabilní v celém rozsahu pH při vysokém tlaku a teplotě až do 200 řC. Byla použita spektrofotometrická detekce při 210 nm. Jako optimální mobilní fáze byla vybrána směs acetonitrilu a vody (pH 9,7) v poměru 50:50. pH vodné fáze bylo upraveno roztokem NH4OH 25 % na hodnotu 9,7. Výsledný roztok byl přefiltrován přes membránový filtr 0,45 mm. Jako optimální množství...
|
|
| |
|
|
Vliv průtokové rychlosti na průběh a možnosti vyhodnocení různých reakcí v SIA systému
Mrákotová, Vladěna ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
1 ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Vladěna Mrákotová Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv průtokové rychlosti na průběh a možnosti vyhodnocení různých reakcí v SIA systému Diplomová práce se zabývala testováním vlivu mísení a průtokové rychlosti na průběh a možnosti vyhodnocení různých reakcí v SIA systému se spektrofotometrickou detekcí. Byla měřena absorbance u dvou druhů chemických reakcí s rozdílnou rychlostí průběhu. U rychleji probíhající reakce bromthymolové modři (BTB) s hydroxidem sodným (NaOH) byla provedena změna pH a reakce byla hodnocena nárůstem absorbance modré formy/poklesem absorbance žluté formy BTB. Byl testován vliv průtokové rychlosti a způsob mísení (různé pořadí aspirace, různé poměry mísení pracovních roztoků). Stejné parametry byly testovány i u pomaleji probíhající dvojstupňové reakce stanovení dusitanů (D) s diazotačně-kopulačním činidlem (DKČ). Navíc byl měřen stop-flow technikou vliv zastavení toku v určitých částech průtokového systému. Byla testována i technika "sandwich". Vyhodnocováno bylo pomocí hodnot výšek a ploch píků. Výhodné bylo použití pomalejších průtokových rychlostí spolu s většími objemovými množstvími pracovních roztoků. Použití bylo příznivé z...
|
|
| |
|
|
Testování optických vlastností Quantum-Dots nanočástic I.
Klusoňová, Edita ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Edita Klusoňová Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Testování optických vlastností Quantum-Dots nanočástic I. Tato diplomová práce se zabývá testováním optických vlastností Quantum-Dots nanočástic (QDs), které byly ověřovány jako zesilovače chemiluminiscenčního (CL) signálu. K reakci byl použit luminol (5-aminoftalylhydrazid) v bazickém prostředí roztoku NaOH, který byl oxidován peroxidem vodíku za přítomnosti katalyzátoru hexakyanoželezitanu draselného. Experiment probíhal v systému sekvenční injekční analýzy (SIA) s využitím detekce ve spirální průtokové cele detektoru Schoeffel. Při reakci byly testovány různé koncentrační hladiny QD nanočástic, s orientací zejména na nízké koncentrace. Testovány byly roztoky QD nanočástic s různým emisním maximem a úpravou povrchu, které byly připravené na Oddělení bioanalytické instrumentace v Ústavu analytické chemie v Brně. Jednalo se o tyto modifikátory povrchu CdTe nanočástic: merkaptopropionová kyselina (MPA 520 nm, MPA 540 nm, MPA 636 nm), thioglykolová kyselina (TGA 620 nm), merkaptoethylamin (NH2 590 nm) a částice CdTe/CdS obalené merkaptopropionovou kyselinou (MPA CdTe/CdS 640 nm). U každé nanočástice proběhlo...
|
|
|
Automatizace liberačních testů pro uvolňování biologicky aktivních látek z nanovláken
Kodedová, Marie ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Marie Schneidrová Školitel: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Automatizace liberačních testů pro uvolňování biologicky aktivních látek z nanovláken Tato diplomová práce se zabývá automatizací liberace antibiotika tetracyklinu (TTC) z nanovlákenného nosiče, za využití neseparační průtokové metody sekvenční injekční analýzy. Pro detekci signálu byl používán UV-VIS spektrofotometr. Měření byla realizována za využití 1-3 paralelně zapojených Franzových cel umístěných ve vodní lázni. Jako liberační média byly použity tlumivé roztoky o pH 7,4 a 4,5. Liberace TTC probíhala ze dvou různých nanovlákenných nosičů - typ "A" a "AK", lišících se v postupu při své výrobě. Každý z nich tedy vykazoval odlišné vlastnosti, týkající se především množství navázaného TTC a způsobu jeho vazby na nosič. Výroba těchto nanovláken byla realizována Technickou univerzitou v Liberci za využití technologie NanoSpiderTM . Měření probíhala za různých, předem stanovených podmínek, reprezentujících stav lidské kůže - dvě rozdílné hodnoty pH (7,4; 4,5) a teploty (32řC; 37řC). Byly využívány také čtyři různé typy membránových filtrů, které liberační profily v průběhu měření různě ovlivňovaly. Jednalo se o filtry...
|
|
|
Vývoj superkritické fluidní extrakce pro izolaci biologicky aktivních látek
Kuda, Lukáš ; Pilařová, Veronika (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lukáš Kuda Školitel: PharmDr. Veronika Pilařová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj superkritické fluidní extrakce pro izolaci biologicky aktivních látek Cílem práce bylo optimalizovat metodu superkritické fluidní extrakce pro získání kvercetinu, flavonoidu s antioxidační aktivitou, ze sušeného a drceného plodu kdouloně obecné (Cydonia oblonga Mill.). Superkritická fluidní extrakce je metoda, při které je využívána nadkritická tekutina pro extrakci požadovaných sloučenin. Nejčastějším rozpouštědlem je čistý CO2, který je na základě svých fyzikálně chemických vlastností vhodným extrakčním činidlem pro extrakci nepolárních látek. V případě extrakcí polárních sloučenin se k nadkritické tekutině přidávají organická rozpouštědla jako ethanol, methanol či isopropanol. V závislosti na množství přidaného organického rozpouštědla můžeme definovat tradiční SFE, extrakci pomocí tekutiny obohacené o CO2 a extrakci pomocí kapalin za zvýšeného tlaku. Teplota a tlak patří mezi další klíčové parametry ovlivňující výtěžnost extrakce a je potřeba je pečlivě optimalizovat. Optimalizace metody pro extrakci kvercetinu probíhala v několika na sebe navazujících krocích. Nejprve byly jednotlivé parametry testovány podle...
|
|
|
Vývoj metody on-line extrakce na tuhé fázi pomocí průtokových metod
Vinklárek, Jan ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Jan Vinklárek Školitel: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj metody on-line extrakce na tuhé fázi pomocí průtokových metod Cílem předložené diplomové práce bylo vyvinout a optimalizovat metodu využívající spojení extrakce na tuhé fázi a průtokových metod. Extrahovaným analytem byl zvolen kreatinin a biologickým materiálem moč. V prvním kroku se metoda nejprve optimalizovala (koncentrace a průtok promývacího činidla, průtok vzorku a standardu). Poté se testovala robustnost metody, a nakonec její správnost a opakovatelnost, dále se testovala i stabilita naředěných vzorků. Všechny tyto testy dopadly dobře a podařilo se metodu optimalizovat. Finální parametry metody jsou následující: Sorbent - SPH Iontosorb 100 Promývací činidlo - 50% acetonitril, nasáváno 0,5 ml Eluční činidlo - 1% vodný roztok hydroxidu amonného, nasáváno 0,5 ml Vzorek ředěný kyselinou octovou o pH 2,4, nasáváno 20 µl, nebo 10 µl podle koncentrace vzorku (rozhodnutí o změně nasávaného objemu metoda provede sama, v programu je rozhodovací algoritmus) Pro zjištění koncentrace vzorku je používaná metoda standardního přídavku. Používá se standard o koncentraci 2mg/l v nástřicích 0, 10, 20 µl. Vzorky se měří v...
|
host ::
RSS.