|
|
Rizikové faktory aterosklerózy a polarizace makrofágů v tukové tkáni
Králová, Anna ; Poledne, Rudolf (vedoucí práce) ; Vrablík, Michal (oponent) ; Zicha, Josef (oponent)
Ateroskleróza představuje hlavní příčinu kardiovaskulárních onemocnění a prozánětlivý stav proces aterogeneze stimuluje. Od devadesátých let se ukázalo, že tuková tkáň nemá funkci pouze endokrinní, ale vzhledem k přítomnosti různých imunocytů s vysokou sekrecí cytokinů jde i o velmi důležitý imunitní orgán. Lokální rezidenční makrofágy představují hlavní složku ve vzniku tohoto zánětu. Díky začlenění do unikátního transplantačního programu v IKEM, který nám zajištoval dostupnost peroperačně odebrané tukové tkáně a její následnou a bezprostřední analýzu, jsme byli schopni na základě rozdílné exprese povrchových markerů charakterizovat jednotlivé subpopulace monocytů/makrofágů a díky rozdílné expresi těchto markerů zařadit makrofágy do prozánětlivé a protizánětlivé populace. Ze vzorků podkožní (SCAT), perivaskulární (PVAT) a viscerální (VAT) tukové tkáně od zdravých žijících dárců ledvin (LKD) jsme po získání stromavaskulární frakce pomocí průtokové cytometrie analyzovali fenotyp makrofágů. Na počátku experimentů jsme si vybrali molekulu kalprotektinu jako proinflamační marker. V dalších popsaných experimentech jsme si ale zvolili jinou cestu a pro určení prozánětlivého fenotypu jsme si zvolili receptor CD16. Tento receptor je současně s výskytem receptoru CD14 považován za marker proinflamačních...
|
|
|
Biologický význam změn cévní stěny a aterosklerotického plátu pro rozvoj aterosklerotického postižení věnčitých tepen
Horváth, Martin ; Hájek, Petr (vedoucí práce) ; Poledne, Rudolf (oponent) ; Kovárník, Tomáš (oponent)
Akutní komplikace aterosklerózy jsou typicky způsobené tepenným uzávěrem na podkladě akutní trombózy formující se v místě ruptury tzv. vulnerabilního aterosklerotického plátu (VP). Včasná identifikace VP by mohla napomoci těmto příhodám předcházet. Současné metody pro zhodnocení kardiovaskulárního rizika jsou zaměřeny na opatření na populační úrovni a pro zhodnocení rizika individuálního jedince nejsou dostatečně citlivé a specifické. Disertační práce se proto zabývala možnostmi in vivo detekce VP pomocí biomarkerů a zobrazovacích metod. V první části práce jsme se soustředili na detekci mikroRNA (miR), které jsou v posledních letech zkoumány jako slibné biomarkery celé řady onemocnění včetně aterosklerózy. Hladiny miR jsme určovali pomocí kvantitativní polymerázové řetězové reakce ve vzorcích periferní žilní krve pacientů ve velmi časné fázi infarktu myokardu s elevací ST segmentů (STEMI), kteří sloužili jako nejbližší klinický model akutní ruptury VP. Výsledky vedly k identifikaci dvou miR (miR-331 a miR-151-3p), které byly deregulovány u STEMI a mohly by být biomarkery VP. V další části výzkumu jsme se zabývali možnostmi invazivního zobrazení VP pomocí intravaskulárního ultrazvuku a blízké infračervené spektroskopie (IVUS a NIRS). Potvrdili jsme možnost bezpečné detekce NIRS dat v karotických...
|
|
|
Lipidomická analýza tukové tkáně pacientů s ischemickou chorobou srdeční
Tomášová, Petra ; Vecka, Marek (vedoucí práce) ; Poledne, Rudolf (oponent) ; Neckář, Jan (oponent)
Stále stoupající incidence ischemické choroby srdeční (ICHS) je jedním z nejvýznamnějších zdravotních problémů současné doby v České republice i celosvětově. Rizikovým faktorem rozvoje ICHS je obezita a diabetes mellitus 2. typu (DM2T). Metabolismus lipidů je vlivem těchto onemocnění velmi ovlivněn, přičemž významnou roli v těchto změnách hraje i tuková tkáň, dříve považovaná za pouhé úložiště energie. Dnes je diskutována i jako endokrinní orgán a její vliv na celotělový metabolismus je významný. Pro sledování metabolismu lipidů je účinným nástrojem lipidomická analýza, která spojuje výhody stanovení velkého množství analytů, malého množství vzorku a jeho rychlé přípravy. V první fázi práce jsem optimalizovala HPLC-MS metodu necílené lipidomické analýzy v tukové tkáni. V další fázi jsem metodu využila pro porovnání subkutánní a epikardiální tukové tkáně. Na závěr své práce jsem zhodnotila vliv ICHS a DM2T na lipidový profil subkutánní a epikardiální tukové tkáně. Optimalizace preanalytické fáze umožnila analýzu celkem 206 lipidových molekul v obou typech tukové tkáně. Epikardiální tuková tkáň oproti subkutánní obsahovala vyšší zastoupení fosfatidylcholinů (např. PC(32:0), PC(32:1), PC(36:4)) a nižší množství triacylglycerolů (např. TAG(18:1,18:2,18:1)). Výsledky naznačují, že velikost lipidových...
|
|
|
Využití komplexu PAPP-A/proMBP v časné diagnostice a prevenci různých typů ischemické choroby srdeční a zdokonalení léčebně preventivní péče o rizikové pacienty a jejich rodiny.
Hájek, Petr ; Macek, Milan (vedoucí práce) ; Kalousová, Marta (oponent) ; Poledne, Rudolf (oponent)
Většina lékařských rozhodnutí je podpořena výsledky diagnostických testů, které pomáhají rozlišit normální od abnormálního. Výběr vhodného testu a správná interpretace jeho výsledku jsou nezbytnými kroky k určení správné diagnózy a k volbě příslušné léčby. Rychlý průkaz akutního koronárního syndromu je klíčový pro optimální načasování další léčby, neboť včasné zahájení intervence přímo ovlivňuje prognózu pacienta. Jedním z nadějných markerů nestabilního aterosklerotického plátu je plazmatický protein A spojený s těhotenstvím (pregnancy-associated plasma protein - A, PAPP-A). Ke studiu tohoto markeru jsme zvolili komerčně dostupný systém Kryptor, který se rutinně užívá v prenatálním biochemickém screeningu k záchytu geneticky rizikových gravidit. PAPP-A je metaloproteináza, která je důležitým markerem správné funkce placenty a tím i fyziologického vývoje plodu. Jedinou dosud známou fyziologickou funkcí PAPP-A je ovlivnění biologické dostupnosti růstového faktoru podobného insulinu (IGF - insulin like growth factor). IGF hraje významnou roli nejen v rozvoji aterosklerotického postižení, ale i při reparativních procesech tkáňového poškození. Na rozdíl od jiných metaloproteináz nebyl dosud podíl PAPP-A na destabilizaci aterosklerotického plátu prokázán. Nejdříve jsme v pilotní práci ověřili možnost využití...
|
|
|
Role intracelulárního železa v lymfo/monocytech v procesu aterogeneze
Riško, Peter ; Kraml, Pavel (vedoucí práce) ; Poledne, Rudolf (oponent) ; Karásek, David (oponent)
ROLE INTRACELULÁRNÍHO ŽELEZA V LYMFO/MONOCYTECH V PROCESU ATEROGENEZE MUDr. Peter Riško Úvod: Zvýšená hladina zásobního železa je spojena s vyšší frekvencí kardiovaskulárních příhod (KVP). Cíle a hypotézy: Studie zkoumá vztah mezi LIP (labilní pool železa) v cirkulujících monocytech a markery metabolismu železa a aterosklerózy (zánět, oxidativní stres, endotelová dysfunkce a arteriální elasticita) u pacientů s chronickým kardiovaskulárním onemocněním a zdravých dobrovolníků, a u dlouhodobých dárců krve a zdravých ne-dárců. Metody: Od probandů byla získána podrobná anamnéza a bylo provedeno antropometrická měření (tělesna výška, váha a obvod pasa a boků, výpočet indexu tělesné hmotnosti a poměr pas-boky). U všech respondentů byly měřeny / vypočteny tyto parametry: krevní tlak (systolický / diastolický), index kotník- paže (ankle-brachial index - ABI), pulzní tlak a střední arteriální tlak, cardio-ankle vascular index (CAVI), augmentation index (AI), pre-ejection time (PEP) a ejection time (ET), sonografické vyšetření břicha a karotických tepen. Odběr vzorků krve probíhal ráno, po minimálně 10 hodinovém lačnění. Provedli jsme základní biochemické vyšetření a měřili jsme parametry zánětu, endoteliální dysfunkce, oxidačního stresu. V izolovaných monocytech jsme stanovovali hladinu LIP. Výsledky: Pacienti s...
|
|
|
Endoteliální funkce a dysfunkce, možnosti detekce a vztah k vybraným rizikovým faktorů aterosklerózy
Šejda, Tomáš ; Poledne, Rudolf (vedoucí práce) ; Filipovský, Jan (oponent) ; Češka, Richard (oponent)
1 Univerzita Karlova v Praze Lékařská fakulta v Plzni Autoreferát disertační práce Endoteliální funkce a dysfunkce, možnosti detekce a vztah k vybraným rizikovým faktorům aterosklerózy MUDr. Tomáš Šejda Praha 2008 2 Doktorské studijní programy v biomedicíně Univerzita Karlova v Praze a Akademie věd České republiky Obor: vnitřní nemoci Předseda oborové rady: Prof. MUDr. Ondřej Topolčan, CSc. Školicí pracoviště: I. interní klinika FTN a IPVZ, Praha Pracoviště pro výzkum aterosklerózy IKEM, Praha Autor: MUDr. Tomáš Šejda Školitel: Prof. Ing. Rudolf Poledne, CSc. Školitel konsultant: Doc. MUDr. Renata Cífková, CSc. Oponenti: …………………………………… …………………………………… …………………………………… Autoreferát byl rozeslán dne: ................... Obhajoba se koná dne: ………………. v ………. hod. kde …………………….................. ……………………………….. S disertací je možno se seznámit na děkanátě Lékařské fakulty Univerzity Karlovy v Plzni. 3 Disertační práce je předkládána ve formě monotématicky zaměřeného souboru 4 vědeckých publikací. 4 Obsah 1. Souhrn.........................................................5 2. Summary.....................................................7 3. Úvod............................................................9 4. Schéma funkcí endotelu.............................12 5. Cíle disertační...
|
|
|
Patofyziologie a klinické důsledky koronární trombózy po implantaci potahovaných stentů u nemocných s manifestní aterosklerózou
Jakabčin, Jozef ; Červinka, Pavel (vedoucí práce) ; Poledne, Rudolf (oponent) ; Mates, Martin (oponent)
Z recentních vědeckých informací týkajících se diagnostiky a léčby akutního trombotického uzávěru koronární tepny po koronární intervenci je známo, že významným patofyziologickým procesem je eroze nebo ruptura nestabilního plátu, endoteliální dysfunkce, obnažení subendoteliálních trombogenních struktur a zánětlivý proces v místě ateromového plátu. Zavedení lékem potažených stentů do klinické praxe se významně snížila četnost restenóz v místě implantovaného stentu (a tím i četnost následných revaskularizací) v porovnání se standardními ocelovými stenty [1,39,48,12,13,47,59]. Po prezentování výsledků některých studií v roce 2006 a 2007, poukazujících na možný zvýšený výskyt pozdních trombóz lékových stentů, vzrostl vědecký zájem o patofyziologii a patologii pozdní trombózy i doby trvání duální protidestičkové léčby po implantaci lékem potažených stentů [18,19,20,23]. Studie BASKET-LATE švýcarských autorů poprvé poukázala na možný vyšší výskyt pozdních trombóz lékových stentů a s nimi spojených kardiovaskulárních příhod, nevyjímaje náhlou kardiální smrt. Zatímco restenóza v místě implantovaného koronárního stentu je relativně benigní proces, akutní trombóza ve stentu se považuje za velmi závažnou komplikaci s mortalitou vyšší 50% [24]. Cílem naší práce bylo posoudit četnost kardiovaskulárních příhod...
|
|
|
Faktory ovlivňující metabolizmus homocysteinu u vybraných nemocí s komplexní etiopatogenezí
Veselá, Kamila ; Anděl, Michal (vedoucí práce) ; Nečas, Emanuel (oponent) ; Rušavý, Zdeněk (oponent) ; Poledne, Rudolf (oponent)
V současné době dochází v medicíně k velkému rozvoji molekulárně genetických technik, které významně pomáhají objasňovat příčiny vybraných nemocí. U některých chorob je genetický podklad již dobře znám. Jedná se především o monogenně podmíněná onemocnění. Bohužel u řady onemocnění zůstává jejich genetická příčina stále neznámá. Největší skupinu tu tvoří tzv. komplexní nemoci, kde se na vzniku a rozvoji onemocnění podílejí jak faktory genetické tak negenetické. K těmto chorobám patří např. aterosklerosa, diabetes mellitus, orofaciální rozštěpy, preeklampsie, defekty neurální trubice a mnohé jiné. Komplexní onemocnění jsou závažným zdravotním a sociálním problémem ve vyspělých zemích. Objasnění všech rizikových faktorů je věnována velká pozornost, protože při znalosti těchto faktorů se nabízejí možnosti účinné prevence a léčby. Cílem mé práce bylo získat nové poznatky faktorech ovlivňujících metabolismus homocysteinu s ohledem na vznik některých komplexních nemocí v české populaci.
|
|
|
Effect of selected nutrients on skeletal muscle mitochondrial metabolism
Tůmová, Jana ; Anděl, Michal (vedoucí práce) ; Poledne, Rudolf (oponent) ; Drahota, Zdeněk (oponent)
SOUHRN Kosterní sval hraje významnou roli v udržování metabolické homeostázy celého organismu. Metabolické změny v kosterním svalu přispívají k patogenezi celé řady onemocnění, jako je obezita, diabetes 2. typu a hypertenze. Nadbytek a nevhodné složení živin negativně ovlivňují metabolismus kosterního svalu. Porozumění mechanismům, kterými k tomu dochází, je tedy důležitým cílem metabolického výzkumu. Cílem této práce bylo sledovat viabilitu buněk kosterního svalu a parametry mitochondriální respirace po experimentálně indukovaných změnách v dostupnosti nebo složení vybraných živin (mastných kyselin a glutaminu). Pokusili jsme se také objasnit mechanismy zodpovědné za pozorované změny, jako je poškození mitochondriální DNA (mtDNA) nebo aktivace jaderných receptorů. Jako in vitro model kosterního svalu byly použity kultivované svalové buňky. Dále jsme sledovali mitochondriální funkci a akumulaci tuku v kosterním svalu u veganů, tedy jedinců konzumujících striktně rostlinnou stravu. Na svalových buňkách linie C2C12 jsme studovali účinky volných mastných kyselin (VMK). Zjistili jsme, že již relativně nízké dávky nasycené kyseliny palmitové zvýšily produkci peroxidu vodíku, indukovaly poškození mtDNA a mitochondriální respirační dysfunkci a snížily viabilitu myoblastů. Diferencované myotuby byly více...
|
|
|
Metabolizmus železa, oxidační stres a progrese aterosklerózy
Syrovátka, Petr ; Kraml, Pavel (vedoucí práce) ; Poledne, Rudolf (oponent) ; Vokurka, Martin (oponent)
Feritin, oxidační stres a inzulínová rezistence Cíl: Cílem naší průřezové studie bylo posoudit vztah mezi endogenními zásobami železa, oxidativním stresem a inzulínovou rezistencí v souboru zdravých mužů primární prevence kardiovaskulárních onemocnění. Metodika: Studie se zúčastnilo celkem 151 dobrovolníků ve věku 35-60 let. U všech jsme vyšetřovali antropometrické ukazatele, parametry metabolického syndromu, inzulínovou rezistenci, zánětlivé markery, parametry oxidačního stresu a parametry endotelové dysfunkce. Výsledky: Hladina sérového feritinu korelovala pozitivně s obvodem pasu, body mass indexem, inzulínovou rezistencí, hladinou triglyceridů a inverzně s hladinou HDL cholesterolu. Dále jsme nalezli pozitivní korelaci mezi feritinem a oxidovanými LDL a pokročilými produkty oxidace proteinů po adjustaci k věku, obvodu pasu, body mass indexu a k měřeným parametrům zánětu (vysoce senzitivní C-reaktivní protein, fibrinogen, interleukin-6 a tumor nekrotizující faktor - alfa). V krokové multivariační regresní analýze byli nezávislými determinantami sérové hladiny feritinu triglyceridy, obvod pasu a aminotransferázy. Závěr: Naše výsledky dokladují vztah mezi plasmatickým feritinem a oxidativně modifikovanými lipidy a proteiny in vivo. Zvýšené endogenní zásoby železa mohou přispívat k inzulínové...
|
host ::
RSS.