|
|
Vliv flubendazolu na podání temozolomidu v buňkách glioblastoma multiforme
Dvořáková, Kateřina ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kateřina Dvořáková Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv flubendazolu na podání temozolomidu v buňkách glioblastoma multiforme Glioblastoma multiforme (GBM) je jedním z nejčastějších a nejagresivnějších nádorů mozku u dospělých. I přes značné pokroky v léčbě se jedná o nevyléčitelné nádorové onemocnění s velmi špatnou prognózou a s mediánem přežití pouze 12 až 15 měsíců od stanovení diagnózy. Zlatým standardem léčby je maximální možná chirurgická resekce následovaná chemo-radioterapií za použití protinádorového léčiva temozolomidu (TMZ). Problémem u použití TMZ však bývá rychle se rozvíjející rezistence. Cílem této práce bylo prozkoumat účinek potenciálního protinádorového léčiva, anthelmintika flubendazolu (FLU) a účinek FLU v kombinaci s TMZ na buňky GBM. Pro tuto práci byly použity dvě GBM buněčné linie - A172 a T98G. FLU obecně vykazoval vyšší efekt na životnost buněk GBM, zejména u buněk T98G. Navíc použití různých kombinací TMZ + FLU prokázalo ještě vyšší inhibiční účinek na životaschopnost buněčných linií GBM. Kombinace TMZ + FLU také snižovala expresi -tubulinu a III-tubulinu, zároveň byly pozorovány zajímavé změny v expresi STAT3 a EGFR a dále snížení exprese...
|
|
|
Srovnání chelatačních účinků klinicky používaných perorálních chelátorů a 8-hydroxychinolinů
Zárubová, Pavla ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Pavla Zárubová Konzultant: PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název práce: Srovnání železo chelatačních účinků klinicky používaných perorálních chelátorů a 8-hydroxychinolinů Železo je esenciálním prvkem účastnícím se na celé řadě životně důležitých procesů. Avšak nadbytečné železo může být pro organismus toxické v důsledku katalýzy tvorby volných radikálů. Nejčastější příčinou přetížení organismu železem (tzv."iron overload") je dlouhodobé podávání transfuzí u různých typů anémií. Každá transfuze představuje přívod 200-250 mg železa do organismu, což při vylučování 1- 2 mg denně vede ke hromadění železa v organismu. Důsledkem je vznik komplikací, jako jsou např. srdeční poškození a fibróza jater. Riziko vzniku těchto vážných komplikací lze snížit podáváním chelátorů železa. K chelatační terapii u chronického přesycení organismu železem se tradičně používá deferoxamin, k jeho nevýhodám ale patří nutnost částé parenterální aplikace. V současné době jej lze nahradit modernějšími perorálně podávanými chelátory (deferasirox, deferipron). Nabízí se ale také celá řada potenciálních nových indikací (záněty, nádory, kardiovaskulární a neurodegenerativní onemocnění). Ve všech těchto stavech...
|
|
| |
|
| |
|
|
Studium interakcí vybraných anthokyanidinů s farnesoidním X receptorem
Jeřábková, Jana ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Jana Jeřábková Školitel: Doc. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Název diplomové práce: Studium interakcí vybraných anthokyanidinů s farnesoidním X receptorem Lidský farnesoidní X receptor (FXR) patří do superrodiny nukleárních receptorů, které vystupují jako ligandy-aktivované transkripční faktory. FXR se váže do specifických regulačních oblastí DNA a spouští expresi řady cílových genů. Tyto regulované geny se účastní metabolismu a transportu žlučových kyselin, udržení homeostázy krevních lipidů, lipoproteinů, glukózy a dále se podílí na udržení střevní bakteriální rovnováhy, hepatoprotekci a regeneraci jater. V popředí zájmu současných studií je testování řady ligandů FXR pro léčbu a prevenci mnoha onemocnění jako je cholestáza, onemocnění cholesterolovými žlučovými kameny, steatohepatitida, dyslipidémie, ateroskleróza, diabetes mellitus 2. typu, metabolický syndrom, rakovina jater a další formy rakoviny, např. karcinom prsu. My jsme se v této experimentální diplomové práci zaměřili na testování potenciálních ligandů lidského farnesoidního X receptoru ze skupiny přírodních rostlinných barviv anthokyanidinů (cyanidin, delfinidin, malvidin, pelargonidin, peonidin a petunidin) za použití lidské...
|
|
|
Role ABC přenašečů v klinické praxi
Tornová, Petra ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Role ABC transportérů v klinické praxi ATP-binding cassette (ABC) je rodina transportních proteinů, která vypuzuje léčiva z buňky díky energii z ATP a zamezí tak jejich akumulaci v buňce. V současnosti známe sedm podrodin ABC transportérů (ABCA až ABCG), kteří se vyskytují jak v normálních tkáních, tak zhoubných nádorech. Podílejí se na přenosu mnoha látek, včetně vylučování toxinů z jater, ledvin a trávicího traktu a dále omezují průnik toxinů do důležitých orgánů, jako jsou mozek, placenta, varlata. Chemoterapie nádorových onemocnění je vážně limitována tzv. fenoménem mnohočetné rezistence (MDR), který vykazují buňky některých nádorů. Jedním z mechanismů rezistence je aktivní eflux široké škály cytostatik buněčnou membránou. Nejlépe popsaný transportní protein při vzniku rezistentních nádorů je MDR1/P-glycoprotein. Množství klinických testů naznačuje, že jeho přítomnost v nádorové tkáni (primární nebo získaná) vede k špatným klinickým výsledkům chemoterapie. Byly vyvinuty různé typy látek a techniky pro zásah do ABC zprostředkovávané MDR a snahy o snížení funkčnosti a potlačení exprese těchto transportérů. Zvýšená akumulace léčiv a zvrat lékové rezistence, užitím P-gp inhibitorů, byli velmi dobře zdokumentovány in vitro, bohužel se však doposud nedaří uspokojivě zopakovat in vitro data s inhibitory MDR v...
|
|
|
Implication of the Gabaergic System in Altered Responses to Stress Associated to Maternal Separation
Martišová, Eva ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
IN CZECH (SOUHRN PRÁCE) Summary in Czech (Souhrn práce) 2 Tato práce se zabývá zapojením GABAergního systému do změněné reakce na stres vyvolané maternální separací u potkana. Cílem práce bylo studovat vliv maternální separace na GABAergní systém, přesneji na biochemické markery tohoto systému (hladiny GABA neurotransmiteru, exprese GABAA receptorů), a studovat na pohlaví závislé rozdíly v chování a neurochemických procesech u potkana indukované maternální separací. Aby bylo možné sledovat výše zmíněné cíle, nejprve bylo nutné vyvinout model maternální separace u potkana. Mláďata potkana byla separována od matky po dobu tří hodin denně od postnatálního dne 2 do postnatálního dne 21 (v postnatálním období, kdy jsou snížené schopnosti reagovat na stresove stimuly). V postnatální den 23 byla odstavena, rozdělena do skupin stejného pohlaví a bez významných manipulací ponechána vyrůst do dospělosti. Po dosažení dospělosti (> 60 dní) byli potkani rozděleni do dvou skupin. První skupina byla usmrcena dekapitací a jednotlivé regiony mozkové tkáně (přední a spánková kůra mozková, corpus striatum a hippocampus) byly použity ke stanovení hladin GABA vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií a ke stanovení míry exprese GABAA receptorů western blot technikou. Druhá skupina byla podrobena Porsolt forced swimming...
|
|
|
Oprava oxidativního poškození DNA u buněk čínského křečíka deficientních v nukleotidové excizní reparaci DNA
Strejčková, Lada ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Oprava oxidativního poškození DNA u buněk čínského křečíka deficientních v nukleotidové excizní reparaci DNA Abstrakt V této rigorózní práci jsme se pokusili charakterizovat opravu oxidativního poškození u ovariálních buněk křečíka čínského. K experimentům jsme využili metodu kometového testu, ke zvýšení citlivosti měření jsme použili specifické endonukleázy a specifické inhibitory excizní reparace - inhibitor poly(ADP-ribóza)polymerázy (PARP) 3- aminobenzamid (3-AB) a cytosinarabinosid s hydroxymočovinou (AraC /HU). PARP-1 je faktorem důležitým pro opravu poškození pomocí bázové excizní reparace (BER). Buňky deficientní v PARP-1 vykazují zhoršení pravděpodobně jak long- patch LP-BER, tak short-patch SP-BER. O AraC/HU je známo, že inhibuje long-patch excizní reparaci. V našich pokusech jsme při opravě poškození způsobeného peroxidem vodíku (H2O2) pozorovali vliv 3-AB, účinek AraC/HU se neprojevil. Pro srovnání jsme provedli též pokusy s metylmetansulfonátem (MMS). U buněk ovlivněných tímto monofunkčním alkylačním činitelem jsme zaznamenali zpomalení reparace v přítomnosti jak 3-AB, tak i AraC/HU. Na základě těchto zjištění se domníváme, že oprava poškození způsobeného vlivem MMS i vlivem H2O2 probíhá u buněk křečíka čínského formou BER, ovšem odlišným mechanismem - u poškození zůsobeného MMS pravděpodobně...
|
|
| |
|
|
Lékové interakce derivátů resveratrolu s nukleárním receptorem PXR
Marešová, Veronika ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Veronika Bečicová Školitel: Prof. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Název diplomové práce: Lékové interakce derivátů resveratrolu s nukleárním receptorem PXR Deriváty resveratrolu jsou přírodní látky stilbenoidní struktury s antioxidační aktivitou, obsažené především v červeném víně a grepu. V minulosti se studovaly interakce resveratrolu s pregnanovým X receptorem (PXR), který reguluje nejdůležitější biotransformační enzymy v játrech a střevě včetně cytochromu P450 3A4 (CYP3A4). Tyto publikované výsledky si však často protiřečí. V mé diplomové práci jsem se zaměřila na studium interakcí resveratrolu a jeho derivátů s PXR receptorem pomocí modifikované metody gene reporter assay spojené s kvantitativní reverzní polymerázovou řetězovou reakcí (qRT-PCR). Tato metoda byla zavedena, jelikož resveratrol i jeho deriváty inhibovaly luciferázu, nemohly být proto testovány klasickou metodou gene reporter assay. Účinky resveratrolu na expresi CYP3A4 jsem rovněž studovala qRT-PCR na diferencované jaterní linii HepaRG. Podařilo se zavést metodu gene reporter assay s detekcí luciferázy pomocí qRT-PCR na hepatomové linii HepG2 transfekované CYP3A4 reportérovým luciferázovým konstruktem. U všech testovaných...
|
host ::
RSS.