|
| |
|
|
Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC IV.
Seidlová, Martina ; Pilařová, Pavla (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Diplomová práce: Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC IV. Vypracoval(a): Martina Seidlová Školitel(ka): PharmDr.Pavla Pilařová, Ph.D. V této diplomové práci byla prováděna studie retenčního chování léčiv v extrémních podmínkách pro kolonu schopnou měřit pH v rozmezí 1-12 na koloně Kinetex EVO C18 (150 x 3 mm). Pro vyšší pH se studovala tyto léčiva: kvetiapin a jeho dva metabolity - norkvetiapin a 7-hydroxykvetiapin, bromhexin, kodein, zolpidem a jeho nečistota, fluoxetin a aciklovir. Nejlepších výsledků dosahoval kvetiapin s jeho metabolity, proto byly vybrány pro další testování a možnost separace z plazmy. Jako mobilní fáze byl použit octanový pufr o pH 10 v poměru 70:30 k organické fázi, která byla tvořena acetonitrilem a methanolem (55:5). Pro nízké pH byla studována tyto léčiva: kyselina salicylová, kyselina acetylsalicylová, aciklovir, bromhexin a fluoxetin. Nejlepších výsledků dosahovala kyselina salicylová a acetylsalicylová, proto byly použity pro další testování a možnost separace v léčivém přípravku. Jako mobilní fáze byl použit fosfátový pufr o pH 2,2 s acetonitrilem v poměru 80:20. Průtok byl nastaven na 1,0 ml/min, teplota na koloně byla 25řC. Detekce probíhala...
|
|
|
Studium chirálních aspektů biotransformace léčiv instrumentálními analytickými metodami
Holmanová, Veronika ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Kovaříková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Bc. Veronika Holmanová Školitel: Doc. PharmDr. Milan Nobilis, CSc. Název diplomové práce: Studium chirálních aspektů biotransformace léčiv instrumentálními analytickými metodami Byla vyvinuta nová chirální chromatografická metoda pro zhodnocení stereospecifity lidských a potkaních cytosolických karbonylreduktas a mikrosomálních oxidas zapojených do biotransformace nabumetonu. Vzniklá LLE-HPLC-PDA metoda umožňovala extrakci, separaci a UV detekci prochirálního nabumetonu a jeho metabolitů I.fáze biotransformace, včetně enantiomerů dvou chirálních produktů karbonylové redukce. Jako vnitřní standard sloužil methylester naproxenu. Pro liquid-liquid extrakci byl použit diethylether. Dostatečnou separaci 9 analytů zajišťovala za isokratických podmínek mobilní fáze o složení MeOH 1M NaClO4 pH 3 (75:25, v/v) ve spojení s Chiralcel OD-R 250mm×4.6 mm kolonou. Při průtoku 0,5 ml/min trvala jedna analýza 60 min. Efluent z kolony byl monitorován photodiode-array detektorem (zaznamenávající celé spektrum nebo vybrané vlnové délky - 225 a 265 nm). Výsledky biotransformace nabumetonu in vitro s cytosolickými a mikrosomálními frakcemi hepatocytů byly porovnány u dvou živočišných druhů (potkan,...
|
|
|
Vliv vybraných látek ovlivňujících centrální nervový systém na kostní metabolismus
Fekete, Soňa ; Živný, Pavel (vedoucí práce) ; Horák, Pavel (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
Zvýšení průměrné délky života světové populace je spojeno se zdravotními problémy. Jedním z těchto problémů, který se často vyskytuje obzvláště u starších lidí je snížení kvantity a kvality kostní hmoty nebo-li osteoporóza. Je to systémové skeletální onemocnění způsobené úbytkem kostní hmoty a u žen i mužů představuje významný zdravotní problém. Je charakterizována nízkou kostní hmotou, poškozením mikroarchitrektury kostní tkáně a zvýšením křehkosti kostí s náchylností ke zlomeninám. Osteoporotické fraktury významně zvyšují morbiditu a mortalitu pacientů. Mezi rizikové faktory, které mohou mít vliv na vznik osteoporózy patří dlouhodobé užívání léků, jako jsou např. antiepileptika a antidepresiva. Cílem této práce bylo zhodnotit účinek orchidektomie a vliv novějších antiepileptik (levetiracetam, lacosamid, topiramat, lamotriginu) a antidepresiv (mirtazapin, venlafaxinu a trazodonem) na kostní metabolismus u zdravých samců potkanů kmene wistar. Prvním cílem bylo zjistit vliv orchidektomie na metabolismus kostí u potkanů. Zjistili jsme, že orchidektomie měla negativní vliv na kostní metabolismus u potkanů. Tyto výsledky potvrzují, že tato zvířata jako vhodné modely pro zkoumání androgenní modulace složení těla. Druhým cílem bylo zjistit vliv vybraných antiepileptik (levetiracetamu, lacosamid,...
|
|
|
Vliv vybraných látek ovlivňujících centrální nervový systém na kostní metabolismus
Fekete, Soňa ; Živný, Pavel (vedoucí práce) ; Horák, Petr (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
Zvýšení průměrné délky života světové populace je spojeno se zdravotními problémy. Jedním z těchto problémů, který se často vyskytuje obzvláště u starších lidí je snížení kvantity a kvality kostní hmoty nebo-li osteoporóza. Je to systémové skeletální onemocnění způsobené úbytkem kostní hmoty a u žen i mužů představuje významný zdravotní problém. Je charakterizována nízkou kostní hmotou, poškozením mikroarchitrektury kostní tkáně a zvýšením křehkosti kostí s náchylností ke zlomeninám. Osteoporotické fraktury významně zvyšují morbiditu a mortalitu pacientů. Mezi rizikové faktory, které mohou mít vliv na vznik osteoporózy patří dlouhodobé užívání léků, jako jsou např. antiepileptika a antidepresiva. Cílem této práce bylo zhodnotit účinek orchidektomie a vliv novějších antiepileptik (levetiracetam, lacosamid, topiramat, lamotriginu) a antidepresiv (mirtazapin, venlafaxinu a trazodonem) na kostní metabolismus u zdravých samců potkanů kmene wistar. Prvním cílem bylo zjistit vliv orchidektomie na metabolismus kostí u potkanů. Zjistili jsme, že orchidektomie měla negativní vliv na kostní metabolismus u potkanů. Tyto výsledky potvrzují, že tato zvířata jako vhodné modely pro zkoumání androgenní modulace složení těla. Druhým cílem bylo zjistit vliv vybraných antiepileptik (levetiracetamu, lacosamid,...
|
|
|
Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení endogenních a exogenních látek pro transportní a metabolické studie
Hroch, Miloš ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent) ; Šišpera, Luděk (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát Ing. Miloš Hroch Konzultant Doc. PharmDr. Milan Nobilis, CSc. Název rigorózní práce Vývoj a validace HPLC metod pro stanovení endogenních a exogenních látek pro transportní a metabolické studie Předkládaná disertační práce se zabývá vývojem a validací chromatografických metod v bioanalýze léčiv a jejich metabolitů. Práce přináší v teoretické části seznámení se základy problematiky bioanalýzy s využitím kapalinové chromatografie. Zvláštní zřetel je kladen na novější trendy, zejména v oblasti stacionárních fází. V praktické části je čtenář podrobněji seznámen s vývojem a validací několika bioanalytických metod s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie. První metoda se týká stanovení 5 fluorouracilu a jeho metabolitů. Využito je separace na koloně Luna PFP(2) s gradientovou elucí a UV/VIS detekcí. Diskutována jsou zejména specifika stanovení těchto velmi polárních špatně detekovatelných látek. Vyvinutá a validovaná metoda je používána pro TDM onkologických pacientů léčených s karcinomem rekta. Další diskutovaná metoda se zabývá stanovením polyglutamátů metotrexátu v erytrocytech s využitím isokratické eluce na hybridní koloně Gemini C18 a fluorescenční detekcí po...
|
|
| |
|
|
HPMC-based liposomal mucoadhesive films with model peptide as target API
Belcáková, Hedviga ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Doležal, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Hedviga Belcáková Školiteľ: Prof. Milan Nobilis, CSc; Vernika Fidelj (Heidelberg Universität, Institut für Pharmazie und Molekulare Biotechnologie) Názov diplomovej práce: Lipozomální mukoadhezivní filmy na bázi HPMC s modelovým peptidem jako cílovým API Predmetom diplomovej práce je preliminárna formulačná fáza mukoadhezívnych bukálnych filmov určených k transmukozálnemu podaniu peptidových liečiv. Skúšobné metódy zahŕňajú hodnotenie hrúbky, pevnosti v ťahu, elongácie, reziduálnej vlhkosti, in vitro 'swelling' parametru a podisolučnej integrity lipozómov. Zvolený polymér (hydroxypropyl methylcelulóza) preukázala optimálne vlastnosti v koncentrácii 10 % v kombinácii s polyethylenglykolom (5 %) ako plasticizérom. Použitá koncentrácia lipozómov bola 2 %. Vyvinutá metóda prípravy vykazovala uspokojivú reprodukovateľnosť s priestorom pre optimalizáciu v oblasti homogenizácie. Výber solventu (H2O vs. PBS) preukázal silný vplyv na mechanické vlastnosti formulácie vedúce k značnej strate elasticity a mukoadhezívnej sily. Prídavok lipozómov v tretej fáze bol úspešný. Následná disolúcia mala len mierny vplyv na ich integritu.
|
|
|
Optimalizace chromatografických podmínek pro chirální separaci biologicky aktivních látek.
Novák, Martin ; Kučera, Radim (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Student: Bc. Martin Novák Školitel: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Konzultant Mgr. et Mgr. Rafael Doležal, Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace chromatografických podmínek pro chirální separaci biologicky aktivních látek Diplomová práce se zaměřuje na vývoj HPLC - UV metody pro stanovení enantiomerů látky K 1277 se strukturním vzorcem N - (2 - ((6 - chlor - 1,2,3,4 - tetrahydroakridin - 9 - yl) amino) hexyl - 2 - amino - 3 - (1H - indol - 3 - yl) propylamid dihydro - chlorid, která je vybraným zástupcem ze skupiny hybridních sloučenin takrinu a tryprofanu. Hybridy syntetizované z molekul takrinu a tryptofanu je možné zařadit mezi velmi slibné kandidáty potenciálních léčiv působících v terapii Alzheimerovy choroby. V teoretické části práce přináší seznámení se základní charakteristikou chirality molekul, možnostmi a principy chirálních separačních metod, patofyziologií a klinickými projevy Alzheimerovy nemoci, možnostmi léčby Alzheimerovy nemoci a se stručnou charakteristikou hybridních sloučenin takrinu a tryptofanu. Cílem diplomové práce je nalezení vhodné metody separace enantiomerů vznikajících syntézou z takrinového skeletu a tryptofanové části. Experimentální část práce se...
|
|
|
Achirální a chirální vysokoúčinná kapalinová chromatografie léčiv a jejich metabolitů III.
Horáček, Ondřej ; Nobilis, Milan (vedoucí práce) ; Mokrý, Milan (oponent)
Nabumeton je nesteroidní protizánětlivé proléčivo, které je v játrech přeměněno na účinnou látku kyselinu (6-methoxynaftalen-2-yl)octovou. Rozdíl biotransformace nabumetonu in vitro na potkaních a lidských cytosolárních a mikrosomálních frakcích byl studováno již dříve. Studium stereospecificity enzymů a výpočet enantiomerních poměrů vzniklých chirálních metabolitů, je stejně důležitou charakteristikou enzymu jako je Michaelisova konstanta. Výpočet enantiomerních poměrů metabolitů vzniklých z prochirálních léčiv v in vitro systémech se následně používá k identifikaci nových enzymů zodpovědných za biotransformaci daného prochirálního léčiva. Tato práce se zabývá optimalizací separačních a detekčních podmínek pro achirální a chirální LLE-HPLC-PDA analýzu nabumetonu a jeho šesti metabolitů v extraktech z různých biomatric (lidské jaterní mikrosomální a cytosolární frakce a miniprasečí krevní plasmy). S využitím chirální LLE-HPLC-PDA analýzy byly studovány rozdíly v biotransformaci nabumetonu a racemické směsi 3-HO-nabumetonu mezi mužem a ženou v in vitro podmínkách v extraktech pocházejících z jaterních cytosolárních a mikrosomálních frakcí. Pomocí achirální LLE-HPLC-PDA analýzy byla studována farmakokinetika 6-MNA v krevní plasmě miniprasete po enterálním podání 1 g nabumetonu do miniprasečího...
|
host ::
RSS.