|
|
Využití technik HPLC a UHPLC - MS/MS pro klinický výzkum
Kučerová, Kateřina ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Doležal, Rafael (oponent) ; Kučera, Radim (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Kateřina Kučerová Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Konzultant: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název disertační práce: Využití technik HPLC a UHPLC - MS/MS pro klinický výzkum Disertační práce se zabývá vývojem, optimalizací a validací chromatografických metod a extrakčních postupů. První metoda byla vyvíjena pro stanovení léčiva ze skupiny inhibitorů protonové pumpy omeprazolu a druhá pro stanovení retinolu jako nového potencionálního biomarkeru poškození ledvin. V teoretické části práce jsou blíže popsány jednotlivé analyty, jejich klinický význam, možnosti stanovení a charakteristiky matric, ve kterých byly cílové analyty stanovovány. Dále je zde diskutována úprava vzorku před analýzou a rozebrány validační normy vztahující se k chromatografickým metodám používaným jak ve farmaceutické analýze, tak v bioanalýze. V experimentální části je blíže uveden vývoj, optimalizace a validace UHPLC metod a jejich následné využití. Ve farmaceuticko-analytické části práce je popsáno stanovení omeprazolu v nových suspenzních přípravcích zahrnující využití UHPLC systému, kolon s částicemi s porézním povrchem a velmi jednoduchou úpravu vzorku. V bioanalytické části práce je popsáno...
|
|
|
Úprava biologického materiálu před HPLC analýzou - stanovení alfa tokoferolu v erytrocytární membráně
Pospíchalová, Naďa ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
α-Tokoferol je hlavním antioxidantem buněčných membrán savců, jeho účinky však nespočívají pouze v antioxidační aktivitě. Řada studií poukazuje na to, že hladiny α-tokoferolu v membráně erytrocytů vypovídají lépe o jeho saturaci organismu než hladiny plasmatické. Tato diplomová práce se zabývá stanovením α-tokoferolu pomocí HPLC-UV s využitím diferenciální ultracentrifugace a extrakce tuhou fází (SPE) v přípravě vzorku. Vzorky erytrocytů byly ultracentrifugovány (288 000 g, 3 minuty, 4 řC) v přítomnosti butylhydroxytoluenu (BHT), D-mannitolu, HEPES a CaCl2. Poté byl α-tokoferol extrahován z membrán erytrocytů hexanem pomocí extrakce na tuhou fázi za použití kyseliny askorbové a vnitřního standardu tokoferol acetátu. Extrakt, rozpuštěný v methanolu, byl separován na monolitické koloně Chromolith Performance RP-18e (100 4,6 mm) 100% methanolovou mobilní fází. Absorbance byla změřena při 295 nm.
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných aktivních látek v potravních doplňcích
Jägerová, Kateřina ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Kateřina Jägerová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných aktivních látek v potravních doplňcích V této práci byla vyvinuta HPLC metoda pro současné stanovení rutinu, troxerutinu, diosminu a hesperidinu. Vypracovaná metoda byla aplikována na stanovení výše uvedených analytů ve farmaceutických přípravcích a potravních doplňcích, Cilkanol (Zentiva), Detralex (Les Laboratoires), Hemodin Prebio Forte (Valosun a. s.), MobiVen Micro (Vulm cz a. s.). Pro analýzu byla použita kolona na Ascentis Express RP - Amide (10 cm x 3,0 mm, 2,7 μm) Supelco Analytical, s využitím mobilní fáze o poměru acetonitril/voda 30/70 s přídavkem kyseliny octové na úpravu pH 3. Analýza látek probíhala při průtoku 1 ml/min, teplotě 50řC a tlaku 18,6 MPa. Byla zvolena vlnová délka 283 nm pro hesperidin a 255 nm pro rutin, troxerutin a diosmin. Pro detekci byl použit DAD detektor. Klíčová slova: HPLC, rutin, troxerutin, diosmin, hesperidin, flavonoidy, potravní doplňky
|
|
|
Problematika stanovení neopterinu a kreatininu v moči s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie se zaměřením na klinickou praxi
Kepka, Zdeněk ; Kujovská Krčmová, Lenka (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Zdeněk Kepka Školitel: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název diplomové práce: Problematika stanovení neopterinu a kreatininu v moči s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie se zaměřením na klinickou praxi Tato diplomová práce se zabývá problematikou stanovení neopterinu a kreatininu ve vzorcích moči metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie. V teoretické části jsou shrnuty informace o stanovovaných látkách a možnostech jejich analýzy. Součástí je také rešerše metod publikovaných v odborné literatuře. Dále je ve zkratce představena metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie včetně typů stacionárních fází a chromatografických principů využitých v experimentální části práce. V experimentální části práce jsou ověřovány separační vlastnosti šesti chromatografických kolon pro stanovení neopterinu a kreatininu v moči. Kolony byly porovnávány na základě následujících parametrů: opakovatelnost nástřiku, rozlišení, symetrie píků a účinnost kolony. U vybraných kolon bylo částečně optimalizováno složení mobilní fáze. Ve většině případů byl mobilní fází fosfátový pufr o koncentraci c = 15 mmol/l a pH 6,5. Detekce kreatininu byla prováděna detektorem s diodovým polem při vlnové délce 235...
|
|
|
Využití technik HPLC a UHPLC - MS/MS pro klinický výzkum
Matoušová, Kateřina ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Doležal, Rafael (oponent) ; Kučera, Radim (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Kateřina Kučerová Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Konzultant: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název disertační práce: Využití technik HPLC a UHPLC - MS/MS pro klinický výzkum Disertační práce se zabývá vývojem, optimalizací a validací chromatografických metod a extrakčních postupů. První metoda byla vyvíjena pro stanovení léčiva ze skupiny inhibitorů protonové pumpy omeprazolu a druhá pro stanovení retinolu jako nového potencionálního biomarkeru poškození ledvin. V teoretické části práce jsou blíže popsány jednotlivé analyty, jejich klinický význam, možnosti stanovení a charakteristiky matric, ve kterých byly cílové analyty stanovovány. Dále je zde diskutována úprava vzorku před analýzou a rozebrány validační normy vztahující se k chromatografickým metodám používaným jak ve farmaceutické analýze, tak v bioanalýze. V experimentální části je blíže uveden vývoj, optimalizace a validace UHPLC metod a jejich následné využití. Ve farmaceuticko-analytické části práce je popsáno stanovení omeprazolu v nových suspenzních přípravcích zahrnující využití UHPLC systému, kolon s částicemi s porézním povrchem a velmi jednoduchou úpravu vzorku. V bioanalytické části práce je popsáno...
|
|
|
Využití technik HPLC a UHPLC - MS/MS pro klinický výzkum
Kučerová, Kateřina ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Doležal, Rafael (oponent) ; Kučera, Radim (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Kateřina Kučerová Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Konzultant: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název disertační práce: Využití technik HPLC a UHPLC - MS/MS pro klinický výzkum Disertační práce se zabývá vývojem, optimalizací a validací chromatografických metod a extrakčních postupů. První metoda byla vyvíjena pro stanovení léčiva ze skupiny inhibitorů protonové pumpy omeprazolu a druhá pro stanovení retinolu jako nového potencionálního biomarkeru poškození ledvin. V teoretické části práce jsou blíže popsány jednotlivé analyty, jejich klinický význam, možnosti stanovení a charakteristiky matric, ve kterých byly cílové analyty stanovovány. Dále je zde diskutována úprava vzorku před analýzou a rozebrány validační normy vztahující se k chromatografickým metodám používaným jak ve farmaceutické analýze, tak v bioanalýze. V experimentální části je blíže uveden vývoj, optimalizace a validace UHPLC metod a jejich následné využití. Ve farmaceuticko-analytické části práce je popsáno stanovení omeprazolu v nových suspenzních přípravcích zahrnující využití UHPLC systému, kolon s částicemi s porézním povrchem a velmi jednoduchou úpravu vzorku. V bioanalytické části práce je popsáno...
|
|
|
Porovnání metod stanovení amfetaminových derivátů ve smolce
Vrbová, Romana ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Romana Vrbová Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání metod stanovení amfetaminových derivátů ve smolce Cílem bakalářské práce byla optimalizace nové metody pro stanovení amfetaminových derivátů ve smolce, která bude rychlejší a jednodušší než stávající rutinní metoda v toxikologické laboratoři Masarykovy nemocnice v Ústí nad Labem. V teoretické části bakalářské práce jsou popsány hlavní zástupci amfetaminových derivátů, jejich účinky a metabolismus. Jejich stanovení ve smolce je důležité pro diagnostiku Novorozeneckého abstinenčního syndromu, vyskytujícího se u novorozenců matek užívajících návykové látky během těhotenství. Smolka, první stolice novorozence, je vhodný materiál prokazující expozici drogám a lékům během druhého a třetího trimestru těhotenství. Amfetaminové deriváty byly ve smolce stanoveny metodou plynové chromatografie s hmotnostní detekcí, jejíž principy a instrumentalizace jsou další částí bakalářské práce. V experimentální části je popsána optimalizace nové, výhodnější metody za použití pentafluorobenzoyl chloridu jako derivatizačního činidla a její porovnání s rutinní metodou pomocí anhydridu kyseliny heptafluorobutyrové jako derivatizačního činidla. U nové metody bylo optimalizováno použité...
|
|
|
Sledování stability zásobního roztoku benzalkonium chloridu metodou HPLC
Křesťanová, Petra ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Petra Křesťanová Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Sledování stability zásobního roztoku benzalkonium chloridu metodou HPLC V této diplomové práci je hodnocena stabilita benzalkonium chloridu v zásobním vodném roztoku. Cílem práce bylo vybrat nejvhodnější podmínky uchovávání a stanovit dobu použitelnosti. K provedení stabilitní studie byla použita metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Byly připraveny vzorky o hodnotách pH 6,8 a 5, uchovávané ve skleněných a plastových lahvičkách při laboratorní teplotě a snížené teplotě za nepřístupu světla. Stabilita byla testována v intervalech 0, 7, 14, 28, 60 a 90 dní. Všechny vzorky vykazovaly dobrou stabilitu během celé doby testování, nebyly mezi nimi výrazné rozdíly. Jako doporučené podmínky pro uchovávání byly vybrány laboratorní teplota a prostředí s hodnotou pH 6,8 v nádobách z tmavého skla. Takto připravené roztoky jsou použitelné po dobu tří měsíců.
|
|
|
Problematika stanovení neopterinu a kreatininu v moči s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie se zaměřením na klinickou praxi
Kepka, Zdeněk ; Kujovská Krčmová, Lenka (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Zdeněk Kepka Školitel: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název diplomové práce: Problematika stanovení neopterinu a kreatininu v moči s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie se zaměřením na klinickou praxi Tato diplomová práce se zabývá problematikou stanovení neopterinu a kreatininu ve vzorcích moči metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie. V teoretické části jsou shrnuty informace o stanovovaných látkách a možnostech jejich analýzy. Součástí je také rešerše metod publikovaných v odborné literatuře. Dále je ve zkratce představena metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie včetně typů stacionárních fází a chromatografických principů využitých v experimentální části práce. V experimentální části práce jsou ověřovány separační vlastnosti šesti chromatografických kolon pro stanovení neopterinu a kreatininu v moči. Kolony byly porovnávány na základě následujících parametrů: opakovatelnost nástřiku, rozlišení, symetrie píků a účinnost kolony. U vybraných kolon bylo částečně optimalizováno složení mobilní fáze. Ve většině případů byl mobilní fází fosfátový pufr o koncentraci c = 15 mmol/l a pH 6,5. Detekce kreatininu byla prováděna detektorem s diodovým polem při vlnové délce 235...
|
|
|
Development and validation of method for determination of of Cyclosporine in biorelevant mediums
Tichoň, Matej ; Matysová, Ludmila (vedoucí práce) ; Kujovská Krčmová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytickej chémie Kandidát: Matej Tichoň Školiteľ: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Vývoj a validácia metódy pre stanovenie cyklosporínu A v biorelevantných médiách Pre stanovenie cyklosporínu A v biorelevantných médiách bola vytvorená nová analytická metóda za použitia ultra-vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Analýza bola uskutočnená na kolóne KinetexTM 1,7 µm C18, 50 x 2,1 mm (Phenomenex, USA). Mobilná fáza bola tvorená ultračistou vodou okyslenou kyselinou fosforečnou na pH = 2,40 a zmesou metanol : acetonitril (90 : 10) v celkovom pomere vodnej a organickej fázy 30 : 70. Analýza prebiehala 5 minút pri teplote 60 řC s konštantným prietokom 0,5 ml/min. Pri analýze bola použitá gradientová elúcia, ktorá v čase 0 minút začínala koncentráciou 70 % organickej fázy a stúpala do času 5 minút na koncentráciu 100 %. Cyklosporín A bol detegovaný pri 210 nm. Retenčný čas látky bol 3,08 min. Po nájdení optimálnych podmienok bola metóda plne validovaná. Kľúčové slová: cyklosporín A, UHPLC, biorelevantné média
|
host ::
RSS.