|
|
Látky ovlivňující imunitní systém
Horká, Zuzana ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Zuzana Horká Školitel: Doc. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Název diplomové práce: Látky ovlivňující imunitní systém Tato práce se zaměřuje na moderní přístupy v rámci imunomodulační terapie. Imunitní systém patří spolu s nervovou a endokrinní soustavou mezi základní regulační mechanismy lidského organismu. Hlavní funkcí imunitního systému je udržování jeho integrity. Poruchy regulace imunitních reakcí mohou vést k rozvoji různých patologických stavů či onemocnění. V těchto případech je vhodné terapeutické ovlivnění imunitního systému pomocí vhodných léčiv - imunomodulancií. Tato léčiva jsou schopna inhibovat či stimulovat imunitní reakce. Imunosupresivní farmakoterapie se využívá v léčbě alergických a autoimunitních onemocnění či v transplantační medicíně. Imunosupresiva jsou velmi rozsáhlou skupinou látek, které se vzájemně liší jak chemickou strukturou, tak mechanismem svého účinku. V rámci imunosupresiv se tato práce podrobně věnuje inhibitorům kalcineurinu, mTOR inhibitorům, fingolimodu a tématu monoklonálních protilátek. Stimulace imunitního systému prostřednictvím vhodných imunomodulancií nalézá uplatnění v terapii imunodeficiencí, infekcí a v léčbě nádorových onemocnění....
|
|
|
Implication of the Gabaergic System in Altered Responses to Stress Associated to Maternal Separation
Martišová, Eva ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
IN CZECH (SOUHRN PRÁCE) Summary in Czech (Souhrn práce) 2 Tato práce se zabývá zapojením GABAergního systému do změněné reakce na stres vyvolané maternální separací u potkana. Cílem práce bylo studovat vliv maternální separace na GABAergní systém, přesneji na biochemické markery tohoto systému (hladiny GABA neurotransmiteru, exprese GABAA receptorů), a studovat na pohlaví závislé rozdíly v chování a neurochemických procesech u potkana indukované maternální separací. Aby bylo možné sledovat výše zmíněné cíle, nejprve bylo nutné vyvinout model maternální separace u potkana. Mláďata potkana byla separována od matky po dobu tří hodin denně od postnatálního dne 2 do postnatálního dne 21 (v postnatálním období, kdy jsou snížené schopnosti reagovat na stresove stimuly). V postnatální den 23 byla odstavena, rozdělena do skupin stejného pohlaví a bez významných manipulací ponechána vyrůst do dospělosti. Po dosažení dospělosti (> 60 dní) byli potkani rozděleni do dvou skupin. První skupina byla usmrcena dekapitací a jednotlivé regiony mozkové tkáně (přední a spánková kůra mozková, corpus striatum a hippocampus) byly použity ke stanovení hladin GABA vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií a ke stanovení míry exprese GABAA receptorů western blot technikou. Druhá skupina byla podrobena Porsolt forced swimming...
|
|
|
Mechanizmy vzniku rezistence vůči platinovým cytostatikům
Bouška, Petr ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
1. Abstrakt Ačkoliv první platinová sloučenina, cisplatina, byla poprvé popsána již v roce 1845, její biologická aktivita byla objevena o více než 100 let později. Od té doby je cisplatina a její klinicky využívané analogy karboplatina a oxaliplatina široce používána pro léčbu mnoha lidských karcinomů. Mezi ně patří zejména ovariální, cervikální, renální a nemalobuněčný plicní karcinom, karcinom hlavy a krku, prsu, tlustého střeva, žaludku, sarkom a lymfom. Bohužel je léčba často doprovázena vážnými nežádoucími účinky, ze kterých nefrotoxicita, periferní neurotoxicita a útlum kostní dřeně patří mezi ty nejzávažnější. Další významnou překážkou v jejich klinickém využití je vznik lékové rezistence. Tato práce hodnotí možné mechanismy vzniku rezistence na platinové sloučeniny. Jsou rozmanité a zahrnují (i) sníženou akumulaci platinových sloučenin způsobenou influxními (Aquaporin 9, CTR1, OCT1, OCT2) a efluxními (ATP7A, ATP7B, ABCG2) transportéry; (ii) zvýšenou detoxifikaci pomocí thiolových sloučenin glutathionu a metallothioneinu; (iii) zvýšenou schopnost opravovat jaderná poškození (NER, MMR a homologní rekombinace), zvýšenou toleranci k jaderným poškozením (Replicative bypass), inhibici pro-apoptických faktorů (kaspáza-3, -8, Fas a další) a nebo zvýšenou expresi inhibitorů apoptózy (Xiap, Bcl-2, Bcl-xL)....
|
|
|
Nejnovější přístupy k léčbě Diabetes Mellitus
Hadjiyiangou, Katerina ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Český abstrakt Diabetes mellitus (DM) je nejznámější endokrinní choroba pankreatu s celosvětově stoupající incidencí. Je způsobena poruchou pankreatických ostrůvků a pankreatu při tvorbě dostatečného množství inzulínu, což má za následek abnormální zvýšení hladiny glukózy v krvi (hyperglykémii), která je považována za známku diabetu. V důsledku toho je hlavním úkolem léčby diabetu sledování stavu glykémie. Onemocnění diabetes mellitus můžeme dělit na dvě skupiny, diabetes mellitus 1. typu (T1DM), který je rovněž znám jako diabetes mellitus závislý na inzulínu, a diabetes mellitus 2. typu (T2DM), který je znám jako diabetes mellitus nezávislý na inzulínu. Léčba obou typů DM vyžaduje mnoho změn v životním stylu jako je zvýšení tělesné aktivity a snížení váhy za účelem zlepšení metabolické kontroly a kvality života. Většina pacientů však nakonec vyžaduje terapii antidiabetickými léky. Předložená studie byla vypracována se záměrem podat přehled současně dostupné vědecké literatury týkající se obou typů DM a prodiskutovat současné a nové přístupy k léčbě, přičemž se snaží o zdůraznění nových metod. Za účelem vypracování této studie jsme procházeli Medline, Pubmed, Google Scholar a elekronickou knihovnu Univerzity Karlovy, abychom sledovali anglicky psané původní studie a přehledné články o DM a nové přístupy k...
|
|
|
Studium interakcí antivirotik s vybranými placentárními transportéry
Karbanová, Sára ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Kacerovský, Marian (oponent) ; Mladěnka, Přemysl (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Sára Karbanová Školitel: prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Konzultant: doc. PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název disertační práce: Studium interakcí antivirotik s vybranými placentárními transportéry Terapie infekce HIV u těhotných žen je založena na podávání kombinované antiretrovirální terapie zajišťující vysokou efektivitu potlačení proliferace viru v krevním oběhu matky. Součástí je vždy také antiretrovirotikum s dobrým placentárním přechodem, které zajišťuje profylaxi plodu proti vertikální nákaze. Pro gravidní pacientky infikované hepatitidou C (HCV) doposud žádný doporučovaný farmakoterapeutický postup není k dispozici, nicméně současné důkazy naznačují, že snížení množství viru v oběhu matky koreluje se sníženou pravděpodobností přenosu viru na plod. Aby bylo možné dále rozvíjet farmakoterapeutické postupy léčby těchto onemocnění v těhotenství a zajistit jejich bezpečnost pro plod, je nutné znát mechanismy placentárního přestupu anti(retro)virotik z matky do plodu. V této dizertační práci jsme se věnovali látkám odvozeným od nukleosidů (anti-HIV abakaviru, emtricitabinu, zidovudinu, tenofoviru disoproxil fumarátu a anti-HCV ribavirinu) s popsaným vysokým placentárním přestupem a...
|
|
|
Neurogenetický potenciál kmenových buněk u myší
Slabá, Barbora ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Červený, Lukáš (oponent)
Neurální kmenové buňky (NKB) se vyskytují v dospělém nervovém systému savců, nacházejí se ve dvou specifických oblastech: subventrikulární zóna předního mozku a subgranulární zóna gyrus dentatus v hipokampu. NKB získávají své specifické vlastnosti, vyzrávají a integrují se do funkčních celků, předtím než se mohou funkčně zapojit do nervového systému. Stále víme málo o mechanismech, které kontrolují tyto procesy a o funkci nově vznikajících neuronů v dospělém mozku. Velké množství faktorů na molekulární úrovni a vliv prostředí, to vše se může podílet na regulaci proliferace, vývoje a diferenciace somatických kmenových buněk v dospělém nervovém systému. NKB dávají vznik třem hlavním typům nervových buněk: neuronům, astrocytům a oligodendrocytům. Ukazuje se, že astrocyty mohou hrát klíčovou roli v regulaci neurogeneze: v neporušeném funkčním dospělém mozku i po jeho poškození. Pro odhalení funkce astrocytů v regulaci neurogeneze na molekulární úrovni, je nezbytným krokem nejprve porozumět regulaci neurogeneze v dospělém CNS. Abychom zjistili, jak se projeví odstranění genů intermediálních filament astrocytů (GFAP, vimentin) na počtu NKB, a jak zásah ovlivní vlastnosti neurálních kmenových buněk myší, analyzovali jsme neurosféry neurálních kmenových buněk. Neurosféry sloužili k porovnání charakteristik...
|
|
|
Predikce průchodu takrin-BQCA derivátů přes hematoencefalickou bariéru
Vykoukalová, Nikol ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Nikol Vykoukalová Školitel: prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Název diplomové práce: Predikce průchodu takrin BQCA derivátů přes hematoencefalickou bariéru Tato diplomová práce se zabývá stanovením predikce prostupu takrinových BQCA derivátů, potenciálních léčiv Alzheimerovy choroby, přes hematoencefalickou bariéru (HEB) pomocí metody PAMPA (paralelní umělé membránové pronikání). Pokusili jsme se predikovat prostupnost pomocí koeficientu permeability, studovat závislost mezi rozpustností sloučenin a jejich hodnotou log P (resp. log D) a následný význam těchto ukazatelů k predikci jejich průchodu HEB. K solubilizaci sloučenin byl z důvodu vysoce lipofilní povahy všech testovaných látek použit roztok 1% Pluronicu F-127 v PBS, který již látky svou schopností tvořit micely dokázal solubilizovat a zajistit mj. také jejich konstantní koncentraci v průběhu měření. Vlastní stanovení prostupu se provádělo tak, že se roztoky sloučenin nanesly do donorové části mikrotitračních desek (tzv. sendvičového uspořádání), na jejímž dně byl nanesen roztok lipidu izolovaný z mozku vepře (PBL), který slouží jako membrána simulující fosfolipidovou membránu endotelu mozkových kapilár. Touto membránou procházel...
|
|
| |
|
|
Interakce inhibitorů cyklin-dependentních kináz s ABC efluxními transportéry in vitro: vliv na mnohočetnou lékovou rezistenci v protinádorové terapii
Číhalová, Daniela ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Kollár, Peter (oponent) ; Mičuda, Stanislav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmakologie a toxikologie Kandidátka: Mgr. Daniela Číhalová Školitel: Prof. PharmDr. František Štaud, PhD. Konzultant: PharmDr. Martina Čečková, PhD. Název dizertační práce: Interakce inhibitorů cyklin-dependentních kináz s ABC efluxními transportéry in vitro: vliv na mnohočetnou lékovou rezistenci v protinádorové terapii Cyklin-dependentní kinázy hrají důležitou roli v regulaci buněčného cyklu, jejich zvýšená aktivita však může vést k vývoji nádorových onemocnění. Z tohoto důvodu se tyto enzymy stávají novým racionálním cílem protinádorové terapie, přičemž celá řada látek ze skupiny inhibitorů cyklin-dependentních kináz (CDKI) je momentálně v různých fázích klinického hodnocení. ABC efluxní transportéry jsou exprimovány ve fyziologických tkáních, kde ovlivňují absorpci, distribuci a exkreci svých substrátů včetně léčiv a významně tak určují jejich farmakokinetické vlastnosti. Na druhou stranu, zvýšená exprese ABC transportérů v nádorových buňkách může přispívat ke vzniku mnohočetné lékové rezistence vůči odlišným protinádorovým léčivům. Tři zástupci této rodiny přitom hrají největší roli, a to ABCB1 (P- glykoprotein), ABCG2 (breast cancer resistance protein) a ABCC1 (multidrug resistance- associated protein 1). Inhibitory a...
|
|
|
Inaktivace ICAM-1 genu metodou oligonukleotidů modifikovaných lysinem
Kocourková, Aneta ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
V této studii se projevuje nadějná možnost zvýšení genové exprese konjugací ligandů na antisense oligonukleotidy a siRNA. Při modifikaci se využilo 2'-O-lysylaminohexylové skupiny vázané na uridinovou bazi, která nahradila jednu, dvě až tři baze thyminové. Uvedené záměny a modifikace bazí byly testovány pro zlepšení inhibice proteinové exprese. Efektivita modifikací v inhibici proteinové exprese byla zkoušena na alicaforsenové sekvenci (DNA) a siRNA. Alicaforsen, který se nachází ve třetí fázi klinické studie, je phosphorothioát komplementární k ICAM-1, siRNA, jenž nově prokázala afinitu k ICAM-1, čehož bylo využito při porovnání účinnosti výše zmíněných modifikací a objevení následných možností uplatnění alicaforsen a siRNA v terapii. Poprvé byla pozorována a prokázána down-regulace ICAM-1 na buněčné linii ECV304, která imituje prostředí hematoencefalické bariéry. Nemodifikované/modifikované sekvence oligonukleotidů a siRNA byly transfekovány do ECV304 buněk. Po 24 hodinové transfekci byly buňky rozrušeny chemickou lýzou. Koncentrace získaných proteinů byly stanoveny Bradford analýzou a následná inhibice ICAM-1 byla vyhodnocena western blotem. Hodnoty inhibicí byly standardizovány k odpovídajícímu aktinu a kontrolním buňkám. Vyhodnocení genové exprese proběhlo pomocí denzitometrie autoradiogramů a...
|
host ::
RSS.