|
|
Dvoudimenzionální separace v nízkotlakém systému sekvenční injekční chromatografie
Válová, Olga ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Olga Válová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Dvoudimenzionální separace v nízkotlakém systému sekvenční injekční chromatografie Předmětem této práce byl vývoj nové metody pro separaci dvou látek, které se liší svými chemickými vlastnostmi a zejména lipofilitou. Nově popsaná metoda s názvem dvoudimenzionální sekvenční injekční chromatografie (2D-SIC) v nízkotlakém systému byla v této práci vyvinuta pro analýzu farmaceutického přípravku Otobacid N, jehož účinnými látkami je dexamethason a cinchokain, tj. látkami s rozdílnými jak chemickými, tak i farmakologickými vlastnostmi. Separace byla provedena na dvou rozdílných kolonách. V první dimenzi pro separaci dexamethasonu byla použita monolitní kolona 25 x 4,6 mm C-18 s mobilní fází acetonitril/voda v poměru 35/65, průtokovou rychlostí 15 µl/s. V druhé dimenzi pro separaci cinchokainu byla použita monolitní kolona 10 x 4,6 mm C-18 s předkolonou 5 x 4,6 mm C-18 s mobilní fází acetonitril/voda v poměru 60/40, průtokovou rychlostí 15 µl/s. Spektrofotometrickou detekcí byla zvolena optimální vlnová délka při 240 nm. Relativní směrodatné odchylky (RSD) opakovatelnosti pro dexamethason se pohybovaly v rozmezí 1,88 -...
|
|
|
Hodnocení vlastností nových HILIC stacionárních fází pro analyty ze skupiny pteridinů s využitím metodiky UHPLC-FD
Kaufmannová, Iva ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Iva Kaufmannová Školitel: PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení vlastností nových HILIC stacionárních fází pro analyty ze skupiny pteridinů s využitím metodiky UHPLC-FD Předmětem této diplomové práce je hodnocení vlastností tří typů nových HILIC stacionárních fází určených k identifikaci a stanovení biologicky aktivních látek biopterinu, neopterinu, dihydrobiopterinu a dihydroneopterinu za použití metody UHPLC ve spojení s fluorescenční detekcí. Neopterin slouží jako ukazatel aktivace imunitního systému a zánětlivých onemocnění. Jeho včasná detekce v moči nebo plazmě může pomoci odhalit patologickou imunitní aktivitu. Se zvýšenou hladinou neopterinu se setkáváme u virových či bakteriálních onemocnění, u autoimunitních nemocí, při HIV infekci či u zhoubných nádorů. 7,8 - dihydroneopterin je schopen bránit proteiny a lipoproteiny před oxidačním poškozením. HILIC je chromatografickou metodou, kterou lze použít ke zvýšení retence velmi polárních sloučenin. Využívá polární stacionární fáze a mobilní fáze obsahující určité množství vody a polárního rozpouštědla. UHPLC je nejmodernější technologií umožňující vyvinout tlak okolo 100 MPa. Používá kolony s malými částicemi (< 2...
|
|
|
Využití HPLC pro stanovení barviv ilegálně používaných v potravinách
Šmidrkalová, Tereza ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Tereza Šmidrkalová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Využití HPLC pro stanovení barviv ilegálně používaných v potravinách Tato diplomová práce se zabývá hledáním optimálních podmínek pro stanovení sudanových barviv. Pro stanovení byla využita vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC). V průběhu experimentů bylo testováno několik kolon, různé mobilní fáze a různé typy gradientových elucí. Pro validaci separačních podmínek byla použita kolona na Ascentis Express F5 (100 x 4,6 mm, 2,7 μm). Detekce byla provedena při vlnové délce 500 nm a 426 nm. Separace probíhala za gradientové eluce s mobilní fází acetonitril - voda průtokovou rychlostí 1 ml/min. Nástřik byl 5 μl. Při měření validačních parametrů bylo využito před vlastní separací látek on-line SPE extrakce v HPLC systému na předkolonce Ascentis Express C18 (5 x 4,6 mm, 2,7 μm) s promývací mobilní fází 5% roztok acetonitrilu s vodou. Optimalizace a validace metody proběhla pouze na standardech a metoda byla navržena pro další testování a použití na reálných vzorcích. Klíčová slova: HPLC, sudanová barviva
|
|
|
HPLC stanovení vybraných insekticidů v kosmetickém přípravku
Kameníčková, Daniela ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Daniela Kameníčková Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: HPLC stanovení vybraných insekticidů v kosmetickém přípravku Byly stanovovány účinné složky fenoxykarb a permetrin v kosmetickém přípravku Arpalit® Neo šampon proti parazitům s bambusovým extraktem. Analýza byla provedena metodou HPLC za využití kolony RP-Amide o rozměrech 100 x 3 mm s velikostí částic 2,7 μm a detekce pomocí UV při vlnové délce 225 nm. Separace probíhala za izokratické eluce s mobilní fází acetonitril - voda v poměru 55:45 průtokovou rychlostí 1,0 ml/min. Teplota při průběhu měření byla 60 řC. Pro vyhodnocení byla použita metoda vnitřního standardu, kdy jako vnitřní standard bylo použito barvivo sudan II. Pro separaci byl potřeba časový interval 6 min. Retenční čas fenoxykarbu byl 1,01, sudanu II 2,87 a permetrinu 4,42 min. Rozlišení chromatografických píků fenoxykarbu a sudanu II bylo 10,612 a sudanu II a permetrinu 6,524. Klíčová slova: fenoxykarb, permetrin, HPLC.
|
|
|
Vývoj metody pro stanovení entekaviru v biologických materiálech s využitím UHPLC MS/MS
Gottvald, Tomáš ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Tomáš Gottvald Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj metody pro stanovení entekaviru v biologických materiálech s využitím UHPLC-MS/MS Entekavir je syntetický analog guanosinového nukleosidu, který hraje významnou roli v léčbě virové infekce chronické hepatitidy B. Tato práce byla zaměřena na vývoj vysoce citlivé metody pro stanovení koncentrace entekaviru v biologickém materiálu (potkaní moči) pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií. Při analýze byl použit stabilní izotopicky značený vnitřní standard, entekavir C2 13 N15 . Vzhledem ke struktuře analyzované molekuly bylo vhodné k analýze využít hydrofilní interakční chromatografii (HILIC). Jedním z hlavních úkolů bylo potvrdit tento fakt porovnáním s běžně používanou chromatografií na reverzních fázích (RP-UHPLC) na koloně Acquity BEH C18. Mobilní fáze pro reverzní chromatografii byla optimalizována na složení: acetonitril/0,01% kyselina mravenčí v poměru 4 : 96. HILIC separace byla provedena na koloně Acquity BEH Amide za použití izokratické eluce a složení mobilní fáze acetonitril/5 mM octan amonný pH 4,0 (75 : 25). Ve výsledku HILIC poskytovala lepší výsledky, pokud...
|
|
|
Využití separačních metod v klinickém výzkumu
Plíšek, Jiří ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent) ; Friedecký, David (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Jiří Plíšek Školitel: prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Školitel specialista: doc. RNDr. Dagmar Solichová, Ph.D. Název disertační práce: Využití separačních metod v klinickém výzkumu Disertační práce se zabývá vývojem a validací nových LC metod pro stanovení biologicky aktivních látek, zejména liposolubilních vitaminů (vitamin A, E, D) a jejich metabolitů. Vitaminy patří mezi nezbytné esenciální mikronutrienty, které lidský organismus není schopen syntetizovat s výjimkou steroidního hormonálního prekurzoru vitaminu D. V organismu vitaminy zasahují do řady biochemických reakcí buď přímo, nebo jako koenzymy. Zájem o klinické monitorování těchto látek se v posledních letech dostává stále více do popředí. Z důvodu velmi nízkých sérových koncentrací metabolitů vitaminu D (25-hydroxy vitaminu D3 a 25-hydroxy vitaminu D2) je třeba pro stanovení využít moderních instrumentálních technik, mezi které patří i spojení ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní detekcí. V případě sledovaní hladin vitaminů A (retinol) a E (α-tokoferol) v mateřském mléce a vitaminu E (α-tokoferol) v erytrocytárních membránách je vhodné využití klasické kapalinové chromatografie s detekcí diodového...
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných aktivních látek v potravních doplňcích
Jägerová, Kateřina ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Kateřina Jägerová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení vybraných aktivních látek v potravních doplňcích V této práci byla vyvinuta HPLC metoda pro současné stanovení rutinu, troxerutinu, diosminu a hesperidinu. Vypracovaná metoda byla aplikována na stanovení výše uvedených analytů ve farmaceutických přípravcích a potravních doplňcích, Cilkanol (Zentiva), Detralex (Les Laboratoires), Hemodin Prebio Forte (Valosun a. s.), MobiVen Micro (Vulm cz a. s.). Pro analýzu byla použita kolona na Ascentis Express RP - Amide (10 cm x 3,0 mm, 2,7 μm) Supelco Analytical, s využitím mobilní fáze o poměru acetonitril/voda 30/70 s přídavkem kyseliny octové na úpravu pH 3. Analýza látek probíhala při průtoku 1 ml/min, teplotě 50řC a tlaku 18,6 MPa. Byla zvolena vlnová délka 283 nm pro hesperidin a 255 nm pro rutin, troxerutin a diosmin. Pro detekci byl použit DAD detektor. Klíčová slova: HPLC, rutin, troxerutin, diosmin, hesperidin, flavonoidy, potravní doplňky
|
|
|
Development and optimization of chromatographic methods suitable for clinical application
Jenčo, Jaroslav ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Hroboňová, Katarína (oponent) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Jaroslav Jenčo Školiteľ: prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Konzultant: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Názov dizertačnej práce: Vývoj a optimalizácia chromatografických metód vhodných pre klinickú aplikáciu Predkladaná dizertačná práca je rozdelená do niekoľkých častí, kopírujúcich pracoviská, na ktorých som postupne pracoval. Zjednocujúcim prvkom je vývoj a optimalizácia metód na prípravu vzoriek biologicky aktívnych látok a ich následná analýza za pomoci separačných metód. V teoretickej časti sú charakterizované cieľové látky, z biochemického, fyzikálno - chemického a analytického hľadiska. Sú v nej popísané základné charakteristiky extrakčných postupov a prehľad metód používaných na stanovenie popísaných látok v biologickom materiáli. V prvej, hlavnej experimentálnej časti, sa dizertačná práca zaoberá vývojom, optimalizáciou a validáciou analytickej metódy na chromatografickú analýzu vitamínu B1, jeho biologicky aktívnych foriem a aktívnej formy vitamínu B6 v krvi. Je v nej popísaný výber techník úpravy vzoriek, samotná optimalizácia cieľovej metodiky a dôvody jej výberu. V ďalšej časti sa práca zaoberá samotným vývojom chromatografickej metódy a jej aplikáciou na vybrané vzorky...
|
|
|
Vývoj CE-C4D metody pro analýzu sacharidů v medu
Šebestová, Gabriela ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Gabriela Šebestová Školitel: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj CE-C4D metody pro analýzu sacharidů v medu Med je běžně využívaná přírodní směs, u které je nutné sledovat kvalitu kvůli možnému nesprávnému zacházení nebo falšování. Tato diplomová práce je zaměřena na vývoj metody kapilární elektroforézy s kapacitně vázanou bezkontaktní vodivostní detekcí (CE-C4D) pro stanovení obsahu sacharidů ve vzorcích medu. Pro optimalizaci separačních podmínek bylo využito plánování experimentů (DoE), které umožňuje nalezení vhodných separačních podmínek na základě multivariantní optimalizace. Během optimalizace byl zkoumán především vliv těchto faktorů: složení elektrolytu, separační napětí a teplota během separace a vnitřní průměr separační kapiláry. Byly optimalizovány dvě metody: jedna s normálním elektroosmotickým tokem (EOF) a druhá za využití obráceného EOF po přídavku CTAB. Pro validaci a analýzu vzorků medu byla využita metoda v režimu normálního EOF. Separace probíhala v křemenné kapiláře o vnitřním průměru 20 m, celkové délce 48,7 cm a efektivní délce 33,8 cm. Teplota byla 27,7 řC a napětí +16,5 kV. Jako optimální byl zvolen základní elektrolyt o koncentraci 35 mM NaOH a 15 mM...
|
|
|
Studium distribuce substituentů v derivátech na bázi hyaluronanu
Sedláček, Jakub ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Zimčík, Petr (oponent) ; Chmelař, Josef (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra analytické chemie Kandidát Ing. Jakub Sedláček Školitel doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název disertační práce Studium distribuce substituentů v derivátech na bázi hyaluronanu Deriváty na bázi hyaluronanu nacházejí uplatnění v řadě medicínských odvětví. Připravované deriváty bývají charakterizovány molární hmotností a stupněm substituce, nicméně tyto parametry neumožňují odlišit deriváty s rozdílnou distribucí substituentů podél řetězce, které mohou vykazovat rozdílné makroskopické vlastnosti. Z toho důvodu jsou potřebné metody, které dokážou distribuci substituentů postihnout. Předkládaná disertační práce pojednává o stanovení distribuce aminoskupiny v deacetylovaném hyaluronanu. Teoretická část začíná popisem hyaluronanu, jeho struktury a jeho derivátů. Následně se zaměřuje na deacetylovaný hyaluronan, na jeho využití, přípravu a charakterizaci, přičemž hlavní zájem je věnován jeho depolymerizaci na oligosacharidy pomocí deaminačního štěpení nebo pomocí enzymů štěpících hyaluronan. Nakonec jsou uvedeny příklady metod použitých pro analýzu oligosacharidů hyaluronanu pomocí kapalinové chromatografie. Experimentální část popisuje přípravu vzorků deacetylovaného hyaluronanu, stanovení jejich molárních hmotností rozměrově...
|
host ::
RSS.