|
|
Analytické a bioanalytické hodnocení potenciálních léčiv odvozených od aroylhydrazonu
Kresová, Jana ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Stariat, Ján (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) patří mezi progresivní analytické metody používané pro kvalitativní i kvantitativní analýzu léčiv. Tato práce popisuje různé možnosti upravení chromatografické metody pro stanovení BSIH ([2-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-benzyliden]-hydrazid kyseliny isonikotinové) a SIH(salicylaldehyd isonikotinoyl hydrazon) v králičí plazmě. BSIH se řadí mezi prochelátory, které se selektivně aktivují v přítomnosti peroxidu vodíku na chelátor železa SIH. Výhodou BSIH je vyšší stabilita v plazmě a nízká toxicita i při opakovaném podání. Separace BSIH, SIH a vnitřního standardu (o-108) byla zkoušena na několika kolonách za různých chromatografických podmínek. Žádná z vyzkoušených modifikací však nebyla vhodnější než ta, ze které se vycházelo. Analýza probíhala na chromatografické koloně Zorbax Bonus-RP (150 mm x 3,0 mm, částice 3,5 µm,) s předkolonou se stejným sorbentem; průtok 0,3 ml/min. Jako mobilní fáze sloužil fosfátový pufr (10mM dihydrogenfosforečnan sodný, pH6, upraveno hydroxidem sodným) : acetonitril s methanolem (60:40) (v/v) v poměru 60:40 (v/v). Odezva detektoru byla zaznamenána při vlnové délce 297 nm. Byla ověřena linearita metody v rozmezí koncentrací od 10 µM do 100 µM pro BSIH a SIH. Stabilita BSIH a SIH v králičí plazmě byla sledována...
|
|
|
Metabolomic analysis of urine samples using ultra performance liquid chromatography and high resolution mass spectrometry
Mrvová, Andrea ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Stariat, Ján (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Andrea Mrvová Konzultanti: Prof. Seppo Auriola; Katedra farmaceutické chemie, Fakulta zdravotnických věd, Kuopio, Itä-Suomen Yliopisto RNDr. Milan Mokrý, CSc. Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova v Praze Název diplomové práce: Metabolomická analýza vzorků moči s využitím ultra vysokoúčinné kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie Metabolomika se zabývá analýzou nízkomolekulárních metabolitů uvnitř biologického systému. Tato disciplína slibuje velký pokrok nejen v diagnostice onemocnění. Jako nejvýhodnější materiál pro analýzu jsou tělní tekutiny (např. moč, krevní sérum, sliny) a běžně používanými analytickými technikami jsou NMR, GC/MS and LC/MS. Metabolomická analýza poskytuje značné množství dat a jejich vyhodnocení je problematickým úkolem. Je proto snahou vyvinout systém, který zefektivní identifikaci. Záměrem této práce je nalezení optimálních podmínek pro metabolomickou analýzu a testování spolehlivosti počítačem asistovaného postupu detekce a identifikace látek. Práce je předstupněm následné snahy o objevení biomárkrů a definování rozdílů v metabolomické analýze moči zdravého člověka,...
|
|
|
HPLC analysis of drug candidates from the group of aroylhydrazones II.
Stariat, Ján ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
1. ABSTRAKT Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) je v oblasti liečiv jednou z najčastejšie používanou analytickou technikou. Železo je dôležitým biogénnym prvkom, no napriek tomu jeho zvýšené množstvo v organizme pôsobí toxicky. Výskum vysoko selektívnych a účinných biokompatibilných chelátorov železa bol pôvodne inšpirovaný potrebou mobilizovať železo v tkanivách s chronickým preťažením železa. Avšak v posledných rokoch je pozornosť venovaná využitia chelátorov železa tiež pri liečbe bežných onemocnení. Salicylaldehyd isonicotinoyl hydrazon (SIH), biokompatibilný chelátor železa odvodený od aroylhydrazonu, je v dnešnej dobe predmetom aktívneho výskumu ako potenciálne liečivo. Okrem schopnosti viazať železo, vykazuje aj ďalšie zaujímavé farmakologické účinky: antioxidačný, antiproliferatívny, kardioprotektívny, antimalarický a antimikróbny. Táto práca sa zaoberá vypracovaním optimálnych chromatografických podmienok HPLC separácie SIH a jeho potenciálnych metabolitov (isoniazid, acetylisoniazid, salicylaldehyd) a následne využitia tejto separácie k štúdiu možnosti izolácie uvedených látok z moči králika pomocou SPE ako úpravy vzorku. Najlepšia chromatografická analýza bola dosiahnutá použitím kolóny od firmy Phenomenex (2504,6 mm I. D.) s náplňou Prodigy 5u ODS3 100A (5 μm). Mobilná fáza bola v...
|
|
|
Vývoj bioanalytické metody pro stanovení nových potenciálních léčiv odvozených od thiosemikarbazonu v biologickém materiálu
Suprunová, Vlasta ; Stariat, Ján (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie se vzhledem k vysoké citlivosti a selektivitě v současnosti řadí mezi nejpoužívanější analytické metody stanovování obsahu léčiv v biologickém materiálu. Je vhodná jak pro kvantitativní, tak pro kvalitativní analýzu. 2-benzoylpyridin-4-ethyl-3-thiosemikarbazon (Bp4eT) je potenciálním léčivem ze skupiny thiosemikarbazonů, které jsou v dnešní době intenzivně studována a vyvíjena jako protinádorová léčiva. Jejich specifický mechanismus účinku, který je založen na chelataci železa, může výrazně přispět k léčbě nádorů rezistentních vůči standardní chemoterapii. Cílem této práce bylo vyvinout a ověřit základní validační parametry HPLC- MS/MS metody pro stanovení Bp4eT včetně jeho hlavních metabolitů v potkaní plazmě a využít ji pro analýzu vzorků z pilotní farmakokinetické studie na potkanech. Separace Bp4eT a jeho metabolitů bylo dosaženo na chromatografické koloně Discovery HS C18 (75 x 4,6 mm, 3 µm) chráněné stejným typem předkolony s použitím mobilní fáze skládající se z 2mM mravenčanu amonného a acetonitrilu v poměru 40:60 (v/v). Byla využita izokratická eluce při průtoku mobilní fáze 0,4 ml/min. Jako detektor byl využit hmotnostní spektrometr, přičemž kvantifikace probíhala v SRM módu. Vzorky plazmy byly upraveny pomocí SPE. Metoda byla úspěšně zvalidována a...
|
|
|
Analytické a bioanalytické hodnocení potenciálních léčiv odvozených od aroylhydrazonu
Kresová, Jana ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Stariat, Ján (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) patří mezi progresivní analytické metody používané pro kvalitativní i kvantitativní analýzu léčiv. Tato práce popisuje různé možnosti upravení chromatografické metody pro stanovení BSIH ([2-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-benzyliden]-hydrazid kyseliny isonikotinové) a SIH(salicylaldehyd isonikotinoyl hydrazon) v králičí plazmě. BSIH se řadí mezi prochelátory, které se selektivně aktivují v přítomnosti peroxidu vodíku na chelátor železa SIH. Výhodou BSIH je vyšší stabilita v plazmě a nízká toxicita i při opakovaném podání. Separace BSIH, SIH a vnitřního standardu (o-108) byla zkoušena na několika kolonách za různých chromatografických podmínek. Žádná z vyzkoušených modifikací však nebyla vhodnější než ta, ze které se vycházelo. Analýza probíhala na chromatografické koloně Zorbax Bonus-RP (150 mm x 3,0 mm, částice 3,5 µm,) s předkolonou se stejným sorbentem; průtok 0,3 ml/min. Jako mobilní fáze sloužil fosfátový pufr (10mM dihydrogenfosforečnan sodný, pH6, upraveno hydroxidem sodným) : acetonitril s methanolem (60:40) (v/v) v poměru 60:40 (v/v). Odezva detektoru byla zaznamenána při vlnové délce 297 nm. Byla ověřena linearita metody v rozmezí koncentrací od 10 µM do 100 µM pro BSIH a SIH. Stabilita BSIH a SIH v králičí plazmě byla sledována...
|
|
|
Vývoj bioanalytické metody pro stanovení nových potenciálních léčiv odvozených od thiosemikarbazonu v biologickém materiálu
Suprunová, Vlasta ; Stariat, Ján (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie se vzhledem k vysoké citlivosti a selektivitě v současnosti řadí mezi nejpoužívanější analytické metody stanovování obsahu léčiv v biologickém materiálu. Je vhodná jak pro kvantitativní, tak pro kvalitativní analýzu. 2-benzoylpyridin-4-ethyl-3-thiosemikarbazon (Bp4eT) je potenciálním léčivem ze skupiny thiosemikarbazonů, které jsou v dnešní době intenzivně studována a vyvíjena jako protinádorová léčiva. Jejich specifický mechanismus účinku, který je založen na chelataci železa, může výrazně přispět k léčbě nádorů rezistentních vůči standardní chemoterapii. Cílem této práce bylo vyvinout a ověřit základní validační parametry HPLC- MS/MS metody pro stanovení Bp4eT včetně jeho hlavních metabolitů v potkaní plazmě a využít ji pro analýzu vzorků z pilotní farmakokinetické studie na potkanech. Separace Bp4eT a jeho metabolitů bylo dosaženo na chromatografické koloně Discovery HS C18 (75 x 4,6 mm, 3 µm) chráněné stejným typem předkolony s použitím mobilní fáze skládající se z 2mM mravenčanu amonného a acetonitrilu v poměru 40:60 (v/v). Byla využita izokratická eluce při průtoku mobilní fáze 0,4 ml/min. Jako detektor byl využit hmotnostní spektrometr, přičemž kvantifikace probíhala v SRM módu. Vzorky plazmy byly upraveny pomocí SPE. Metoda byla úspěšně zvalidována a...
|
|
|
Analysis of selected drugs by liquid chromatography I.
Turňová, Ivana ; Pilařová, Pavla (vedoucí práce) ; Stariat, Ján (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Ivana Turňová Vedúci bakalárskej práce: PharmDr. Pavla Pilařová, Ph.D. Názov bakalárskej práce: Analýza vybraných liečiv kvapalinovou chromatografiou I. Vysokoteplotná kvapalinová chromatografia (HTLC - high-temperature liquid chromatography) je jednou z možností rozvoja a ďalšieho pokroku na poli kvapalinovej chromatografie, ktorá sa radí medzi najvyužívanejšie separačné metódy aj vo farmaceutickej analýze. Zároveň HTLC patrí do tzv. green chemistry ("zelenej chémie"), ktorá kladie dôraz na vykonávanie chemickej praxe spôsobom čo najmenej poškodzujúcim životné prostredie. Táto práca predkladá problematiku HTLC vo forme rešerše zameranej na charakteristiku podstatných vlastností HTLC a zásadného vplyvu zvýšenia teploty na dané chromatografické procesy. Popisuje najdôležitejšie výhody, ale i obmedzenia metódy HTLC, predovšetkým pri možnosti jej použitia pri rutinných analýzach. Nakoniec práca uvádza výber z výsledkov niekoľkých experimentálnych štúdií, ktoré sa doteraz zaoberali použitím HTLC v analýze konkrétnych látok zo skupiny liečiv. Kľúčové slová vysokoteplotná kvapalinová chromatografia, analýza liečiv, green chemistry
|
|
|
Vývoj bioanalytické metody pro stanovení nových potenciálních léčiv odvozených od thiosemikarbazonu v biologickém materiálu
Suprunová, Vlasta ; Stariat, Ján (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie se vzhledem k vysoké citlivosti a selektivitě v současnosti řadí mezi nejpoužívanější analytické metody stanovování obsahu léčiv v biologickém materiálu. Je vhodná jak pro kvantitativní, tak pro kvalitativní analýzu. 2-benzoylpyridin-4-ethyl-3-thiosemikarbazon (Bp4eT) je potenciálním léčivem ze skupiny thiosemikarbazonů, které jsou v dnešní době intenzivně studována a vyvíjena jako protinádorová léčiva. Jejich specifický mechanismus účinku, který je založen na chelataci železa, může výrazně přispět k léčbě nádorů rezistentních vůči standardní chemoterapii. Cílem této práce bylo vyvinout a ověřit základní validační parametry HPLC- MS/MS metody pro stanovení Bp4eT včetně jeho hlavních metabolitů v potkaní plazmě a využít ji pro analýzu vzorků z pilotní farmakokinetické studie na potkanech. Separace Bp4eT a jeho metabolitů bylo dosaženo na chromatografické koloně Discovery HS C18 (75 x 4,6 mm, 3 µm) chráněné stejným typem předkolony s použitím mobilní fáze skládající se z 2mM mravenčanu amonného a acetonitrilu v poměru 40:60 (v/v). Byla využita izokratická eluce při průtoku mobilní fáze 0,4 ml/min. Jako detektor byl využit hmotnostní spektrometr, přičemž kvantifikace probíhala v SRM módu. Vzorky plazmy byly upraveny pomocí SPE. Metoda byla úspěšně zvalidována a...
|
|
|
Metabolomic analysis of urine samples using ultra performance liquid chromatography and high resolution mass spectrometry
Mrvová, Andrea ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Stariat, Ján (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Andrea Mrvová Konzultanti: Prof. Seppo Auriola; Katedra farmaceutické chemie, Fakulta zdravotnických věd, Kuopio, Itä-Suomen Yliopisto RNDr. Milan Mokrý, CSc. Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova v Praze Název diplomové práce: Metabolomická analýza vzorků moči s využitím ultra vysokoúčinné kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie Metabolomika se zabývá analýzou nízkomolekulárních metabolitů uvnitř biologického systému. Tato disciplína slibuje velký pokrok nejen v diagnostice onemocnění. Jako nejvýhodnější materiál pro analýzu jsou tělní tekutiny (např. moč, krevní sérum, sliny) a běžně používanými analytickými technikami jsou NMR, GC/MS and LC/MS. Metabolomická analýza poskytuje značné množství dat a jejich vyhodnocení je problematickým úkolem. Je proto snahou vyvinout systém, který zefektivní identifikaci. Záměrem této práce je nalezení optimálních podmínek pro metabolomickou analýzu a testování spolehlivosti počítačem asistovaného postupu detekce a identifikace látek. Práce je předstupněm následné snahy o objevení biomárkrů a definování rozdílů v metabolomické analýze moči zdravého člověka,...
|
|
|
Analytical Evaluation of Drugs and Drug Candidates from the Group of Iron Chelating Agents
Stariat, Ján ; Klimeš, Jiří (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent) ; Šišpera, Luděk (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát Mgr. Ján Stariat Školiteľ Prof. RNDr. Jiří Klimeš, CSc. Názov dizertačnej práce Analytické hodnotenie liečiv a potenciálnych liečiv zo skupiny látok chelatujúcich železo Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) má v analýze liečiv dominantné postavenie, pretože patrí medzi robustné techniky, umožňujúce dosiahnutie účinnej separácie väčšiny analytov prítomných vo vzorku, a zároveň ich kvalitatívne aj kvantitatívne hodnotenie. Pokroky vo vývoji stacionárnych fáz a detekčných techník umožňujú výrazne skrátiť čas analýzy, a zároveň získať celé spektrum informácií o povahe analytov prítomných vo vzorkách aj vo veľmi nízkych koncentráciách. Nádorové ochorenia sa stále radia medzi významné príčiny smrti, z čoho vyplýva požiadavka na vývoj nových liečebných postupov. Stratégia založená na chelatácii železa vnútri nádorových buniek by mohla výraznou mierou prispieť k zlepšeniu prognózy u pacientov s tumormi rezistentnými voči štandardnej chemoterapii. Tento mechanizmus antiproliferativného pôsobenia je aktívne rozvíjaný u novej skupiny potenciálnych liečiv štruktúrne odvodených od thiosemikarbazonu, u ktorých bol cytostatický účinok pozorovaný in vitro aj in vivo Ďalší...
|
host ::
RSS.