|
|
Studium modelových lipidových membrán obsahujících omega-hydroxylované ceramidy
Svatošová, Linda ; Opálka, Lukáš (vedoucí práce) ; Pullmannová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra organické a bioorganické chemie Kandidát: Linda Svatošová Školitel: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Název diplomové práce: Studium modelových lipidových membrán obsahujících omega-hydroxylované ceramidy Acylceramidy (EO-Cer) jsou třídou ceramidů (Cer) s ultradlouhým acylovým řetězcem, na jejichž ω-hydroxylovou skupinu je esterově navázána kyselina linolová. EO-Cer, jejichž význam spočívá ve tvorbě dlouhé lamelární fáze (LPP) a korneocytální lipidové obálky (CLE), jsou nepostradatelnou složkou pro fungování kůže jako bariéry. Porucha biosyntézy EO-Cer spojená s nedostatečnou tvorbou CLE a LPP je základem patofyziologie mnoha kožních onemocnění, včetně některých typů ichtyózy. Jedním z enzymů, k jehož deficitu u těchto ichtyóz dochází, je PNPLA1. Při jeho nedostatečné funkci nedochází k ω-esterifikaci kyselinou linolovou, a tedy ke vzniku EO-Cer, ale naopak dochází ke kumulaci jejich prekurzorů, tedy ω-hydroxylovaných ceramidů (O-Cer). Cílem této práce bylo připravit modelové membrány s obsahem O-Cer a sledovat, jak jejich přítomnost ovlivňuje organizaci lipidů a bariérové vlastnosti modelových membrán. V rámci této práce byly připraveny dva typy membrán - prvním typem byly membrány složené ze směsi cholesterolu, mastných kyselin a velmi...
|
|
|
Vliv Ca2+kationtů a cholesteryl sulfátu na model lidské kožní bariéry
Kelemanová, Aneta ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Paraskevopoulou, Anna (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Autor: Aneta Kelemanová Školitel: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv Ca2+ kationtů a cholesteryl sulfátu na model lidské kožní bariéry Struktura a složení nejsvrchnější vrstvy epidermis, stratum corneum, tvoří kožní bariéru proti transepidermální ztrátě vody. Hlavními složkami stratum corneum jsou korneocyty a mezibuněčná lipidová matrix. Mezibuněčná lipidová matrix je směsí ceramidů, cholesterolu a volných mastných kyselin. Estery cholesterolu, jako je cholesteryl sulfát, jsou také přítomny. Tato unikátní lipidová směs tvoří multilamelární vrstvy s krátkou a dlouhou krystalickou fází s periodicitou zhruba 6 a 13 nm. Oddělená fáze cholesterolu s periodicitou okolo 3,4 nm se také nachází ve stratum corneum. Nejčastější laterální uspořádání lipidové směsi je orthorombické. Hexagonální nebo fluidní uspořádání je méně časté. Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat podmínky pro spontánní uspořádání izolovaných lidských kožních lipidů ve vodném prostředí s přídavkem Ca2+ kationtů a cholesteryl sulfátu. Model lidské kožní bariéry byl vytvořen z připravené lipidové disperze a byl použit pro sledování vlivu přídavku Ca2+ kationtů a cholesteryl sulfátu na lamelární fáze a laterální...
|
|
|
Model lidské kožní bariéry s využitím tenkých vrstev stratum corneum
Soukupová, Romana ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Kováčik, Andrej (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Autor: Romana Soukupová Školitel: Mgr. Petra Pullmanová, Ph.D. Název diplomové práce: Model lidské kožní bariéry s využitím tenkých vrstev stratum corneum Nejsvrchnější vrstva epidermis, stratum corneum, zastává funkci ochranné kožní bariéry. Obsahuje lipidovou matrix, která je tvořena ceramidy, cholesterolem a volnými mastnými kyselinami. Složení a uspořádání těchto lipidů je důležité k zajištění správného fungování kožní bariéry. V lipidové matrix jsou dále rozmístěny bezjaderné korneocyty, které jsou na svém povrchu obklopeny nerozpustnými proteiny s kovalentně navázanými lipidy tvořící korneocytární lipidovou obálku. Cílem této diplomové práce bylo připravit modely lidské kožní bariéry s využitím izolovaného stratum corneum se zachovalou korneocytární lipidovou obálkou a bez zachovalé korneocytární lipidové obálky a následně v těchto modelech sledovat a porovnat uspořádání lipidů. Pro přípravu modelů bylo potřeba ze vzorků kůže získat stratum corneum, ze kterého se následně izolovaly lidské kožní lipidy. Část takto delipidizovaného stratum corneum byla dále saponifikována. Po purifikaci kožních lipidů sloupcovou chromatografií se zjišťovalo jejich složení pomocí vysokoúčinné tenkovrstvé...
|
|
|
Příprava modelu lidské kožní bariéry s využitím depozice tenkých lipidových filmů
Suciu-Šubert, Karina ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Opálka, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Student: Karina Suciu-Šubert Vedoucí: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Název diplomové práce: Příprava modelu lidské kožní bariéry s využitím depozice tenkých lipidových filmů Nejsvrchnější část lidské kůže - stratum corneum, která chrání tělo před vnějším prostředím, je tvořena zrohovatělými buňkami - korneocyty, které jsou obklopené extracelulární matrix vysoce uspořádaných lipidů: ceramidů (Cer), mastných kyselin a cholesterolu. Ochranná bariéra se neustále obnovuje dělením keratinocytů, které se diferencují na korneocyty a nakonec se z povrchu kůže odlučují. Korneocyty mají místo plazmatické membrány korneocytární obálku, která se skládá z bílkovinné části (např. involucrin) a jednomolekulární lipidové části tvořené převážně z ω-hydroxylovaných ceramidů, které jsou k bílkovinné části připojené kovalentními vazbami. Úkolem této diplomové práce byla příprava modelu lidské kožní bariéry s využitím depozice tenkých lipidových filmů. Byly vytvořeny 2 různé směsi lipidů: směs obsahující Cer NS a směs obsahující Cer EOS a NS. Směsi se nanášely na hydrofilní a hydrofobní substrát nastřikováním Linomatem V. Při nastřikování se měnilo množství lipidů, a tím i počet teoretických vrstev na substrátu. Další metodou...
|
|
|
Vliv Ca2+kationtů a cholesteryl sulfátu na model lidské kožní bariéry
Kelemanová, Aneta ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Paraskevopoulou, Anna (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Autor: Aneta Kelemanová Školitel: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv Ca2+ kationtů a cholesteryl sulfátu na model lidské kožní bariéry Struktura a složení nejsvrchnější vrstvy epidermis, stratum corneum, tvoří kožní bariéru proti transepidermální ztrátě vody. Hlavními složkami stratum corneum jsou korneocyty a mezibuněčná lipidová matrix. Mezibuněčná lipidová matrix je směsí ceramidů, cholesterolu a volných mastných kyselin. Estery cholesterolu, jako je cholesteryl sulfát, jsou také přítomny. Tato unikátní lipidová směs tvoří multilamelární vrstvy s krátkou a dlouhou krystalickou fází s periodicitou zhruba 6 a 13 nm. Oddělená fáze cholesterolu s periodicitou okolo 3,4 nm se také nachází ve stratum corneum. Nejčastější laterální uspořádání lipidové směsi je orthorombické. Hexagonální nebo fluidní uspořádání je méně časté. Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat podmínky pro spontánní uspořádání izolovaných lidských kožních lipidů ve vodném prostředí s přídavkem Ca2+ kationtů a cholesteryl sulfátu. Model lidské kožní bariéry byl vytvořen z připravené lipidové disperze a byl použit pro sledování vlivu přídavku Ca2+ kationtů a cholesteryl sulfátu na lamelární fáze a laterální...
|
|
|
Model lidské kožní bariéry s využitím tenkých vrstev stratum corneum
Soukupová, Romana ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Kováčik, Andrej (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Autor: Romana Soukupová Školitel: Mgr. Petra Pullmanová, Ph.D. Název diplomové práce: Model lidské kožní bariéry s využitím tenkých vrstev stratum corneum Nejsvrchnější vrstva epidermis, stratum corneum, zastává funkci ochranné kožní bariéry. Obsahuje lipidovou matrix, která je tvořena ceramidy, cholesterolem a volnými mastnými kyselinami. Složení a uspořádání těchto lipidů je důležité k zajištění správného fungování kožní bariéry. V lipidové matrix jsou dále rozmístěny bezjaderné korneocyty, které jsou na svém povrchu obklopeny nerozpustnými proteiny s kovalentně navázanými lipidy tvořící korneocytární lipidovou obálku. Cílem této diplomové práce bylo připravit modely lidské kožní bariéry s využitím izolovaného stratum corneum se zachovalou korneocytární lipidovou obálkou a bez zachovalé korneocytární lipidové obálky a následně v těchto modelech sledovat a porovnat uspořádání lipidů. Pro přípravu modelů bylo potřeba ze vzorků kůže získat stratum corneum, ze kterého se následně izolovaly lidské kožní lipidy. Část takto delipidizovaného stratum corneum byla dále saponifikována. Po purifikaci kožních lipidů sloupcovou chromatografií se zjišťovalo jejich složení pomocí vysokoúčinné tenkovrstvé...
|
|
|
Příprava analogů fytoceramidů a hodnocení jejich vlivu na bariérovou funkci kůže
Tesař, Ondřej ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Pullmannová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra anorganické a organické chemie Kandidát: Ondřej Tesař Školitel: doc. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Příprava analogů fytoceramidů a hodnocení jejich vlivu na bariérovou funkci kůže Fytoceramidy (FCER) patří do skupiny sfingolipidů. Jsou tvořeny bazickým alkoholem fytosfingosinem (P) a acylovým řetězcem. Společně s dalšími lipidy tvoří extracelulární membránu v lidském stratum corneum (SC), nejsvrchnější vrstvě kůže, která nás chrání před ztrátami vody a průnikem cizorodých látek do našeho těla. O vlivu struktury FCER na funkci této membrány se toho zatím mnoho neví. Cíl práce: Cílem této práce bylo prozkoumat, jakou úlohu hraje v nepropustnosti této bariéry délka postranního nehydroxylovaného acylového řetězce FCER. Metody: Mým úkolem bylo syntetizovat FCER s délkou acylu 2, 4, 6, 24 uhlíků a příprava modelových membrán SC obsahující FCER s délkou acylu 2, 4, 6, 8 nebo 24 uhlíků, dále pak cholesterol, kyselinu lignocerovou a cholesterol sulfát. Permeabilita modelových membrán byla hodnocena ve Franzových difuzních celách. Jako měřené veličiny byly zvoleny elektrická impedance a propustnost pro 2 modelová léčiva: theofylin (TH) a indomethacin (IND), které byly stanoveny pomocí vysokoúčinné kapalinové...
|
|
|
Optimization of the skin barrier model with isolated ceramides of human stratum corneum
Dulanská, Lucia ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikálnej chémie Autor: Lucia Dulanská Školiteľ: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Optimalizácia modelu kožnej bariéry s obsahom ceramidov izolovaných z ľudského Stratum corneum Stratum corneum (SC), najvrchnejšia vrstva kože, reguluje transkutánne straty vody a chráni pred vonkajšími podmienkami a škodlivými látkami. Skladá sa z zrohovatelých buniek - korneocytov a extracelulárnej lipidovej matrix, ktorá je zodpovedná za bariérové funkcie. Korneocyty sú pokryté kovalentne viazanými lipidmi a vytvárajú tak korneocytárnu lipidovú obálku (CLE). CLE sa považuje za prepojenie extracelulárnych lipidov s korneocytmi a slúži ako predlohová matrica. Naším cieľom bolo optimalizovať model kožnej bariéry simulujúcim taktiež prítomnosť CLE. Lipidová časť modelu bola pripravená z ekvimolárnej zmesi izolovaných ceramidov ľudskej kože (hCer), cholesterolu a voľných mastných kyselín (FFA, buď protonovaných alebo deuterovaných) s 5 % (m/m) cholesterol-sulfátom. hCer sa extrahovali z izolovaného ľudského SC a purifikovali sa stĺpcovou chromatografiou. Zloženie hCer sa stanovilo vysokoúčinnou tenkovrstvovou chromatografiou. Častice silikagélu s reverznou a normálnou fázou slúžili ako model CLE a negatívna kontrola....
|
|
|
Studium modelových lipidových membrán obsahujících omega-hydroxylované ceramidy
Svatošová, Linda ; Opálka, Lukáš (vedoucí práce) ; Pullmannová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra organické a bioorganické chemie Kandidát: Linda Svatošová Školitel: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Název diplomové práce: Studium modelových lipidových membrán obsahujících omega-hydroxylované ceramidy Acylceramidy (EO-Cer) jsou třídou ceramidů (Cer) s ultradlouhým acylovým řetězcem, na jejichž ω-hydroxylovou skupinu je esterově navázána kyselina linolová. EO-Cer, jejichž význam spočívá ve tvorbě dlouhé lamelární fáze (LPP) a korneocytální lipidové obálky (CLE), jsou nepostradatelnou složkou pro fungování kůže jako bariéry. Porucha biosyntézy EO-Cer spojená s nedostatečnou tvorbou CLE a LPP je základem patofyziologie mnoha kožních onemocnění, včetně některých typů ichtyózy. Jedním z enzymů, k jehož deficitu u těchto ichtyóz dochází, je PNPLA1. Při jeho nedostatečné funkci nedochází k ω-esterifikaci kyselinou linolovou, a tedy ke vzniku EO-Cer, ale naopak dochází ke kumulaci jejich prekurzorů, tedy ω-hydroxylovaných ceramidů (O-Cer). Cílem této práce bylo připravit modelové membrány s obsahem O-Cer a sledovat, jak jejich přítomnost ovlivňuje organizaci lipidů a bariérové vlastnosti modelových membrán. V rámci této práce byly připraveny dva typy membrán - prvním typem byly membrány složené ze směsi cholesterolu, mastných kyselin a velmi...
|
|
|
Optimization of the skin barrier model with isolated ceramides of human stratum corneum
Dulanská, Lucia ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikálnej chémie Autor: Lucia Dulanská Školiteľ: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Optimalizácia modelu kožnej bariéry s obsahom ceramidov izolovaných z ľudského Stratum corneum Stratum corneum (SC), najvrchnejšia vrstva kože, reguluje transkutánne straty vody a chráni pred vonkajšími podmienkami a škodlivými látkami. Skladá sa z zrohovatelých buniek - korneocytov a extracelulárnej lipidovej matrix, ktorá je zodpovedná za bariérové funkcie. Korneocyty sú pokryté kovalentne viazanými lipidmi a vytvárajú tak korneocytárnu lipidovú obálku (CLE). CLE sa považuje za prepojenie extracelulárnych lipidov s korneocytmi a slúži ako predlohová matrica. Naším cieľom bolo optimalizovať model kožnej bariéry simulujúcim taktiež prítomnosť CLE. Lipidová časť modelu bola pripravená z ekvimolárnej zmesi izolovaných ceramidov ľudskej kože (hCer), cholesterolu a voľných mastných kyselín (FFA, buď protonovaných alebo deuterovaných) s 5 % (m/m) cholesterol-sulfátom. hCer sa extrahovali z izolovaného ľudského SC a purifikovali sa stĺpcovou chromatografiou. Zloženie hCer sa stanovilo vysokoúčinnou tenkovrstvovou chromatografiou. Častice silikagélu s reverznou a normálnou fázou slúžili ako model CLE a negatívna kontrola....
|
host ::
RSS.