|
|
Využití nadkritických tekutin pro extrakci biologicky aktivních látek z listů Eukalyptu
Herbsová, Diana ; Pilařová, Veronika (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Diana Herbsová Školitel: PharmDr. Veronika Pilařová, PhD. Název diplomové práce: Využití nadkritických tekutin pro extrakci biologicky aktivních látek z listů Eukalyptu Blahovičník je v dnešní době využíván pro své protizánětlivé, antibakteriální a antioxidační účinky ve farmaceutickém a kosmetickém průmyslu. Mezi obsahové látky blahovičníku patří flavonoidy, těkavé látky, terpenoidní kyseliny a fenolické kyseliny. Cílem této práce bylo vyvinout dvoukrokovou selektivní metodu pro extrakci látek různých fyzikálně-chemických vlastností z listů korymbie citroníkové pomocí rozpouštědel obsahujících CO2. Nadkritický CO2 je solvent nepolárního charakteru, jehož polaritu a fyzikálně-chemické vlastnosti lze upravit smísením s vhodným polárním rozpouštědlem. Tímto způsobem je možné extrahovat široké spektrum látek. V rámci diplomové práce byly nejprve zoptimalizovány základní parametry, kterými byly teplota v rozmezí 40-80 řC a tlak v rozmezí 100-320 barů, pomocí Box-Behnkenova designu s heptanem a ethanolem/H2O jako kosolventem. Po zvolení optimálních podmínek byla testována kinetika extrakce při průtoku 2 ml/min a 4 ml/min. Finální extrakční metoda založená na dvou po sobě jdoucích krocích byla...
|
|
|
Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC-MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů
Pilařová, Veronika ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Veronika Pilařová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC- MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů. Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat UHPLC-MS/MS metodu určenou pro stanovení koncentrace atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů v biologickém materiálu a dále vyvinout a optimalizovat metodu pro přípravu vzorku biologického materiálu technikou MEPS, t. j. mikroextrakcí pomocí tuhého sorbentu, a tuto metodu zvalidovat. K separaci analytů byla využita kolona Acquity BEH C18 (50 x 2,1 mm, 1,7 µm, Waters). Ionizace analytů byla provedena elektrosprejem v pozitivním i v negativním módu. Jako detektor byl použit trojitý kvadrupól. U každého analytu byl zvolen prekurzorový ion, ion fragmentu a optimalizována kolizní energie a napětí na vstupním kuželu pro každou látku zvlášť. Kvantifikace látek byla provedena pomocí SRM (monitorování vybrané reakce). Pro rosuvastatin lakton, který byl stanovován v pozitivním módu, byla prekurzorovým iontem zvolena protonovaná molekula [M+H]+ . Pro zbylé statiny byl v negativním módu vybrán prekurzorový ion [M-H]- , který měl největší...
|
|
|
Využití superkritické fluidní chromatografie v analýze přírodních látek
Lacmanová, Tereza ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Pilařová, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Tereza Lacmanová Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Využití superkritické fluidní chromatografie v analýze přírodních látek Cílem této diplomové práce je ověření vhodnosti UHPSFC metody s PDA a MS detekcí pro analýzu přírodních látek. Byly vybrány dva zástupci přírodních látek - alkaloidy čeledi Amaryllidaceae účinné v léčbě Alzheimerovy choroby a fenolické látky s antioxidační aktivitou - flavonoidy rutin, kvercetin a jejich metabolity. Analýzy proběhly na systému Acquity UPC2 s PDA a MS detektorem. Základní screening byl proveden na 10 stacionárních fázích: BEH 2-EP, HSS SB C18, BEH, Torus DIOL, Torus 2-PIC, Torus DEA, CSH PFP, Torus 1-AA, Cortecs HILIC a BEH Amide. Zkoušeny byly 4 mobilní fáze: 1. CO2 + MeOH, 2. CO2 + MeOH + 0,1 % NH4OH, 3. CO2 + MeOH + 10 mM mravenčan amonný a 4. CO2 + MeOH + 10 mM mravenčan amonný + 2 % H2O. Podmínky separace byly nastaveny následovně: průtok 1,5 ml/min, teplota 40 řC, tlak 140 bar, gradientová eluce od 2 % do 40 % do 4. minuty, se dvěma izokratickými kroky na začátku a na konci gradientu. Optimalizace chromatografických podmínek zahrnovala změnu složení mobilní fáze, změnu nastavení gradientové eluce i hodnot tlaku a teploty. Pro...
|
|
|
Rodina a její význam v životě dítěte
Pilařová, Veronika ; Sotáková, Hana (vedoucí práce) ; Presslerová, Pavla (oponent)
Bakalářská práce se zabývá rodinnou výchovou a důležitostí rodiny pro dítě předškolního věku. Teoretická část zpracovává odborné poznatky o dítěti předškolního věku a rodinné výchově. Dále se v práci zabývám pojmem rodina, jejími funkcemi a na závěr kresbou rodiny. Praktická část je zaměřena na zkoumání rodin a jejím významem pro dítě. V práci se zaměřuji na čas rodičů trávený s dětmi, prostředí, ve kterém dítě žije a celkovou rodinnou situaci. Výzkum je prováděn pomocí rozhovorů s dětmi, jejich matkami a učitelkami. Pro podtržení celého výzkumu jsem jako doplňkovou metodu použila kresbu rodiny.
|
|
|
Vývoj a optimalizace kroku úpravy vzorku pro rychlé chromatografické analýzy
Pilařová, Veronika ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Bednář, Petr (oponent) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát Mgr. Veronika Pilařová Školitel doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název disertační práce Vývoj a optimalizace kroku úpravy vzorku pro rychlé chromatografické analýzy Hlavním cílem dizertační práce je vývoj moderních extrakčních metod pro přečištění vzorků a pro izolování a zakoncentrování analytů z různého biologického materiálu, včetně biologických tekutin (plazma, sérum, poševní výplachy) a rostlinného materiálu. Moderní techniky pro přípravu vzorku přináší celou řadu výhod jako je snížení objemu vzorku a rozpouštědel, urychlení extrakce, či lepší přečištění vzorků, odstranění molekul matrice a snížení vlivu matricových efektů. Extrakty získáné moderními mikroextrakčními přístupy lze obvykle analyzovat separačními metodami jako jsou ultra-vysokoúčinná kapalinová chromatografie a superkritická fluidní chromatografie ve spojení s hmotnostní detekcí. Tyto separační metody umožňují rychlou analýzu s citlivou a selektivní detekcí a zvyšují také prostupnost vzorků laboratoří. Jednotlivé projekty ukazují možnost využití moderních trendů v oblasti úpravy vzorku, kde pro extrakci analytů byly využity metody mikroextrakce pomocí plněného tuhého sorbentu (MEPS), mikroextrakce na tuhou fázi pomocí plněných...
|
|
|
Vývoj superkritické fluidní extrakce pro izolaci biologicky aktivních látek
Kuda, Lukáš ; Pilařová, Veronika (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lukáš Kuda Školitel: PharmDr. Veronika Pilařová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj superkritické fluidní extrakce pro izolaci biologicky aktivních látek Cílem práce bylo optimalizovat metodu superkritické fluidní extrakce pro získání kvercetinu, flavonoidu s antioxidační aktivitou, ze sušeného a drceného plodu kdouloně obecné (Cydonia oblonga Mill.). Superkritická fluidní extrakce je metoda, při které je využívána nadkritická tekutina pro extrakci požadovaných sloučenin. Nejčastějším rozpouštědlem je čistý CO2, který je na základě svých fyzikálně chemických vlastností vhodným extrakčním činidlem pro extrakci nepolárních látek. V případě extrakcí polárních sloučenin se k nadkritické tekutině přidávají organická rozpouštědla jako ethanol, methanol či isopropanol. V závislosti na množství přidaného organického rozpouštědla můžeme definovat tradiční SFE, extrakci pomocí tekutiny obohacené o CO2 a extrakci pomocí kapalin za zvýšeného tlaku. Teplota a tlak patří mezi další klíčové parametry ovlivňující výtěžnost extrakce a je potřeba je pečlivě optimalizovat. Optimalizace metody pro extrakci kvercetinu probíhala v několika na sebe navazujících krocích. Nejprve byly jednotlivé parametry testovány podle...
|
|
|
Optimalizace extrakce fenolických látek s využitím oxidu uhličitého
Karola, Michal ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Pilařová, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Michal Karola Školitel: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Marcela Hollá Název diplomové práce: Optimalizace extrakce fenolických látek s využitím oxidu uhličitého Tato diplomová práce se zabývá optimalizací extrakce fenolických látek pomocí superkritické fluidní extrakce s využitím oxidu uhličitého ze vzorku zhomogenizovaných jablečných křížal. Pro kvantifikaci a identifikaci analytů obsažených v extraktu, bylo použito 14 standardů s využitím separační metody v UHPLC systému s detektorem založeným na principu diodového pole. Při identifikaci složek extraktů bylo identifikováno 13 analytů a po jejich kvantifikaci bylo zjištěno, že majoritní zastoupení má 6 analytů. Rozdíl sumy koncentrací 6 a 13 analytů byl velmi malý, a proto byla optimalizace prováděna pro těchto 6 majoritně zastoupených analytů, kterými jsou kyselina chlorogenová, epikatechin, katechin, floridzin, kvercitrin a guaiaverin. Optimalizace extrakce probíhala ve 4 na sebe navazujících krocích. Prvním krokem optimalizace bylo určení vlivu a významnosti obsahu CO2 v extrakčním médiu, obsahu H2O v ethanolickém kosolventu, tlaku a teploty na výtěžnost extrakce. Nejvýznamnějším faktorem byl určen obsah CO2 v extrakčním médiu....
|
|
| |
|
|
Vývoj superkritické fluidní extrakce pro izolaci biologicky aktivních látek
Kuda, Lukáš ; Pilařová, Veronika (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lukáš Kuda Školitel: PharmDr. Veronika Pilařová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj superkritické fluidní extrakce pro izolaci biologicky aktivních látek Cílem práce bylo optimalizovat metodu superkritické fluidní extrakce pro získání kvercetinu, flavonoidu s antioxidační aktivitou, ze sušeného a drceného plodu kdouloně obecné (Cydonia oblonga Mill.). Superkritická fluidní extrakce je metoda, při které je využívána nadkritická tekutina pro extrakci požadovaných sloučenin. Nejčastějším rozpouštědlem je čistý CO2, který je na základě svých fyzikálně chemických vlastností vhodným extrakčním činidlem pro extrakci nepolárních látek. V případě extrakcí polárních sloučenin se k nadkritické tekutině přidávají organická rozpouštědla jako ethanol, methanol či isopropanol. V závislosti na množství přidaného organického rozpouštědla můžeme definovat tradiční SFE, extrakci pomocí tekutiny obohacené o CO2 a extrakci pomocí kapalin za zvýšeného tlaku. Teplota a tlak patří mezi další klíčové parametry ovlivňující výtěžnost extrakce a je potřeba je pečlivě optimalizovat. Optimalizace metody pro extrakci kvercetinu probíhala v několika na sebe navazujících krocích. Nejprve byly jednotlivé parametry testovány podle...
|
|
|
Využití superkritické fluidní chromatografie v analýze přírodních látek
Lacmanová, Tereza ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Pilařová, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Tereza Lacmanová Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Využití superkritické fluidní chromatografie v analýze přírodních látek Cílem této diplomové práce je ověření vhodnosti UHPSFC metody s PDA a MS detekcí pro analýzu přírodních látek. Byly vybrány dva zástupci přírodních látek - alkaloidy čeledi Amaryllidaceae účinné v léčbě Alzheimerovy choroby a fenolické látky s antioxidační aktivitou - flavonoidy rutin, kvercetin a jejich metabolity. Analýzy proběhly na systému Acquity UPC2 s PDA a MS detektorem. Základní screening byl proveden na 10 stacionárních fázích: BEH 2-EP, HSS SB C18, BEH, Torus DIOL, Torus 2-PIC, Torus DEA, CSH PFP, Torus 1-AA, Cortecs HILIC a BEH Amide. Zkoušeny byly 4 mobilní fáze: 1. CO2 + MeOH, 2. CO2 + MeOH + 0,1 % NH4OH, 3. CO2 + MeOH + 10 mM mravenčan amonný a 4. CO2 + MeOH + 10 mM mravenčan amonný + 2 % H2O. Podmínky separace byly nastaveny následovně: průtok 1,5 ml/min, teplota 40 řC, tlak 140 bar, gradientová eluce od 2 % do 40 % do 4. minuty, se dvěma izokratickými kroky na začátku a na konci gradientu. Optimalizace chromatografických podmínek zahrnovala změnu složení mobilní fáze, změnu nastavení gradientové eluce i hodnot tlaku a teploty. Pro...
|
host ::
RSS.