|
|
Hydrogelové nosiče pro tkáňové inženýrství
Chocholatá, Petra ; Babuška, Václav (vedoucí práce) ; Kovařík, Tomáš (oponent) ; Pešta, Martin (oponent)
Kostní tkáňové inženýrství se snaží napodobit přirozené chování tvrdých pojivových tkání. V současné době dochází v této oblasti k aktivnímu rozvoji výzkumu a vývoje nových funkčních materiálů. Hlavním směrem v oblasti léčby defektu kostní tkáně je použití biologicky odbouratelných kompozitních materiálů na bázi biopolymerů obohacených o anorganickou složku, případně v kombinaci se složkou buněčnou. Obecně významnou roli zde hrají díky svým vlastnostem hydrogely, které mohou poměrně dobře reagovat na změny podmínek okolního prostředí a jsou používány jako vhodné pro buňky, které tam mohou růst a proliferovat. Strukturou hydrogelu mohou difundovat živiny a odpadní produkty a v neposlední řadě díky tomu mohou sloužit také jako nosiče léčiv. Jejich velkou výhodou, je možnost injekční aplikace s následným gelovatěním in situ. V této práci byly porovnávány fyzikálně zesíťované hydrogely na bázi polyvinylalkoholu (PVA) a kyseliny hyaluronové (HA) v různých objemových poměrech obohacené o hydroxyapatit (HAp) - anorganickou složku vlastní pro kostní tkáň. Začlenění hydroxyapatitu do organické matrix bylo provedeno dvěma způsoby, syntézou in situ přímo a fyzikálním přimícháním předem připraveného hydroxyapatitu. Složení obou typů hydroxyapatitu bylo analyzováno pomocí infračervené spektroskopie a energiově...
|
|
|
Úloha mikroRNA v progresi kardiovaskulárních chorob
Černá, Václava ; Pešta, Martin (vedoucí práce) ; Vítovec, Jiří (oponent) ; Chottová Dvořáková, Magdaléna (oponent)
1 Abstrakt Současný aplikovaný výzkum molekul mikroRNA je zaměřen na identifikaci jejich rolí v patogenezi různých typů onemocnění, včetně kardiovaskulárních (KV), a to s předpokladem jejich uplatnění jako biomarkerů nebo cílů léčby. Kardiovaskulární onemocnění mají v populaci vysokou incidenci i prevalenci, jsou převážně chronická, jsou také vedoucí příčinou hospitalizace i úmrtí a představují proto velkou zátěž pro pacienty i zdravotní systém. Aktuálně je využíváno v diagnostice kardiovaskulárních chorob a odhadu kardiovaskulárního rizika mnoho metabolických parametrů, většinou ze skupiny proteinů a lipidů, zatímco parametrů ze skupiny nukleových kyselin, a to ať již v podobě mutací v molekule DNA, nebo různých molekul RNA, prozatím velice omezeně. Přes nesporný význam a přínos metabolických biomarkerů v diagnóze i prognóze kardiovaskulárních chorob, tyto markery stále neumožňují efektivně identifikovat všechny osoby ve vysokém riziku, a jsou proto hledány další molekuly, které by mohly ke zpřesnění této identifikace přispět. A právě nalezení dalších diagnostických a prognostických markerů pro zpřesnění odhadu KV rizika a následně zefektivnění léčby pacientů ve vysokém riziku je tématem této disertační práce. Zaměřili jsme se na skupinu molekul mikroRNA, krátkých nekódujících RNA, které se účastní...
|
|
|
The Cell-Nanomaterial Interactions and Their Application in Biomedicine
Vrabcová, Lucie ; Hubálek Kalbáčová, Marie (vedoucí práce) ; Pešta, Martin (oponent) ; Benson, Veronika (oponent)
Nanomateriály vstoupily na pole medicíny již na počátku tisíciletí a od té do doby daly vzniknout řadě pokroků a novým možnostem v diagnostice, léčbě i regeneraci, čímž nadále umožňují rozvoj personalizované medicíny. Interakce v nano-měřítku umožňují dosud nepředstavitelné možnosti v ovlivňování procesů na molekulární úrovni. Nové perspektivy v aplikacích nanomateriálů zároveň zvyšují pozornost ohledně otázek bezpečnosti pro zdraví a životní prostředí. Ačkoliv se objevilo mnoho nových biomedicínských aplikací nanomateriálů, většina z nich se stále nachází ve fázi konceptu. Základní in vitro výzkum elementárních interakcí nanomateriálů s biologickým prostředím by tudíž měl být nezbytnou součástí jejich vývoje. Cílem této dizertační práce bylo popsat cytokompatibilitu a interakce dvou typů nanomateriálů s různými lidskými buňkami. Jako první byla testována vhodnost ultra-jemného titanu pro budoucí využití ve vývoji implantátů. Pozitivní efekt byl potvrzen především pro růst osteoblastů a materiál byl doporučen pro preklinické testování jako kostní či zubní implantát. Dále bylo popsáno několik druhů ultra-malých (˂ 5 nm) nanočástic o různém původu (křemík, zlato a platina) v různých podmínkách, abychom získali informace o jejich cytotoxicitě v závislosti na čase a koncentraci a také o jejich chování...
|
|
|
Prognostické a prediktivní faktory u pacientů s metastatickým kolorektálním karcinomem léčených cílenou léčbou
Šorejs, Ondřej ; Fiala, Ondřej (vedoucí práce) ; Pešta, Martin (oponent) ; Poprach, Alexandr (oponent)
Úvod: V posledních letech bylo dosaženo významného pokroku v léčbě metastatického kolorektálního karcinomu (mCRC) díky nástupu cílené léčby. Bevacizumab je monoklonální protilátka (mAb) proti vaskulárnímu endotelovému růstovému faktoru (VEGF) a cetuximab a panitumumab jsou monoklonální protilátky proti receptoru pro epidermální růstový faktor (EGFR). MicroRNA (miR) jsou jednovláknové řetězce nekódující RNA o délce 18-25 nukleotidů, které se podílejí na regulaci genové exprese a tím významně ovlivňují biologické chování nádorových buněk. Dysregulace na úrovni miR jsou považovány za slibné kandidáty na prognostické a prediktivní biomarkery. Cíle: Cílem práce rozdělené na dvě části bylo zhodnocení asociace dysregulací vybraných miR v nádoru s efektem cílené léčby u pacientů s mCRC. Metody: Do první studie bylo zařazeno 63 pacientů s mCRC léčených chemoterapií a bevacizumabem. Do druhé studie bylo zařazeno 46 pacientů s mCRC léčených kombinací chemoterapie s cetuximabem nebo panitumumabem. Hodnocení léčebného efektu zahrnovalo: přežití bez progrese (PFS), celkové přežití (OS), míru dosažení objektivní léčebné odpovědi (ORR) a míru dosažení kontroly onemocněné (DCR). K analýze byly využity vzorky zamražené nádorové a přilehlé nenádorové tkáně získané během operace primárního nádoru. Stanovení miR bylo...
|
|
|
Predikce efektu léčby u solidních nádorů
Houfková, Kateřina ; Pešta, Martin (vedoucí práce) ; Fiala, Ondřej (oponent) ; Šána, Jiří (oponent)
Současný výzkum léčby onkologických onemocnění je zaměřen na identifikaci změn, ke kterým dochází v procesu karcinogeneze a dále na hledání terapeutik, která by projev těchto změn umožnila eliminovat. Včasná diagnostika, stanovení prognózy, sledování průběhu onemocnění a predikce účinku léčby jsou čím dál tím více spojeny se stanovením příslušných biomarkerů. Stanovení prediktivních biomarkerů by se mělo stát neoddělitelnou součástí rozhodnutí o způsobu léčby a ve výsledku tak pacientům pomoci prodloužit délku života a zvýšit jeho kvalitu. A právě nalezení prognostických a prediktivních biomarkerů pro efektivnější léčbu onkologických pacientů bylo cílem této disertační práce. Ve spolupráci s řadou klinických pracovišť Fakultní nemocnice v Plzni jsem se na Ústavu biologie zabývala touto problematikou u nemalobuněčného plicního karcinomu, karcinomu endometria, kolorektálního karcinomu, jaterních metastáz kolorektálního karcinomu, světlobuněčného renálního karcinomu a sarkomů. Zaměřili jsme se především na hledání takových molekul, které jsou zapojené v procesu karcinogeneze a jejichž hladiny v tělních tekutinách nebo přímo v nádorové tkáni by byly schopné předpovědět další vývoj onemocnění nebo léčebnou odpověď. Pomocí molekulárně biologických metod jsme detekovali zejména molekuly na úrovni exprese...
|
|
|
Sledování biologické aktivity kolorektálního karcinomu metodou real-time PCR
Pešta, Martin ; Topolčan, Ondřej (vedoucí práce) ; Pešek, Miloš (oponent) ; Pecen, Ladislav (oponent)
Autor ve své dizertační práci navrhl primery a optimalizoval podmínky provedení kvantitativní PCR pro stanovení exprese genů MMP-7, TIMP-1, MMP-2 a TIMP-2. Prokázal přítomnost exprese genů GAPDH, TIMP-1 a TIMP-2 u nádorových linii HT-29, SW480 a SW620. Zaznamenal vysokou hladinu exprese MMP-7 u linie HT-29. Exprese je o 2-3 řády vyšší než u linií SW480 a SW620. Expresi mRNA MMP-2 u linie HT-29 nezaznamenal. Expresi mRNA MMP-2 detekoval u linií SW480 a SW620. Zjistil, že stanovení exprese absolutně a relativně je u nádorových linií ekvivalentní.Prokázal signifikantně vyšší expresi mRNA MMP-7, TIMP-1, MMP-2 a TIMP-2 v nádorové tkáni oproti normální tkáni. Lze využít při terapii. Nezaznamenal korelaci přítomnosti exprese genů MMP-7, TIMP-1, MMP-2 a TIMP-2 s celkovým přežitím a DFI. Prokázal, že vyšší stadium nádorového onemocnění odpovídá vyššímu mediánu hodnot moměru MMP-2/TIMP-2. 7, Nezaznamenal rozdíl mezi expresí genů TS, TP a DPD v kontrolní a nádorové tkáni. Zaznamenal hraničně signifikantní zvýšení exprese TS u nádorů kolon ve srovnání s tumory rektosigmoidea a rekta. Toto zjištění lze využít při volbě terapie. Zaznamenal hraničně signifikantní korelaci mezi expresí TS a DPD. Toto zjištění lze využít při volbě terapie. Nezaznamenal korelaci hladiny exprese mRNA TS, TP a DPD s celkovým přežitím a DFI.
|
|
| |
|
|
Epigenetic Alternations in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma: Potential Biomarkers
Kovaříková, Helena ; Palička, Vladimír (vedoucí práce) ; Friedecký, David (oponent) ; Pešta, Martin (oponent)
4 1 Summary CZE Dlaždicobuněčné nádory hlavy a krku jsou skupinou heterogenních tumorů vznikajících v epiteliálních buňkách aerodigestivního traktu a jsou charakteristické složitou diagnostikou, léčbou a prognózou onemocnění. Konzumace alkoholu, kouření a infekce vysoce rizikovými lidskými papillomaviry jsou velmi dobře popsané rizikové faktory výskytu nádorů hlavy a krku. Sinonasální karcinomy jsou skupinou nádorů vznikajících v dutině nosní a vedlejších dutinách nosních. Karcinomy orofaryngu jsou nádory vznikající v oblasti krku za ústní dutinou. mikroRNA (miRNA) jsou krátké (~23 nukleotidů) nekódující molekuly RNA účastnící se regulace genové exprese. Primární rolí mikroRNA molekul je negativní regulace translace jako součást komplexu RISC (komplex umlčující geny indukovaný RNA) pomocí represe translace a mRNA degradace. miRNA se účastní regulace procesů u mnoha onemocnění, jako jsou neurodegenerativní choroby, metabolické poruchy a malignity. Kromě toho jsou miRNA rozeznávány jako klíčové molekuly účastnící se kancerogeneze a progrese u různých typů nádorových onemocnění. Ve své výzkumné práci v rámci doktorského studia jsem se zaměřila na výzkum relativní exprese několika dříve vytipovaných mikroRNA s využitím real-time PCR. A dále jsme zkoumali korelaci jejich expresních profilů se zaznamenanými...
|
|
|
The Cell-Nanomaterial Interactions and Their Application in Biomedicine
Vrabcová, Lucie ; Hubálek Kalbáčová, Marie (vedoucí práce) ; Pešta, Martin (oponent) ; Benson, Veronika (oponent)
Nanomateriály vstoupily na pole medicíny již na počátku tisíciletí a od té do doby daly vzniknout řadě pokroků a novým možnostem v diagnostice, léčbě i regeneraci, čímž nadále umožňují rozvoj personalizované medicíny. Interakce v nano-měřítku umožňují dosud nepředstavitelné možnosti v ovlivňování procesů na molekulární úrovni. Nové perspektivy v aplikacích nanomateriálů zároveň zvyšují pozornost ohledně otázek bezpečnosti pro zdraví a životní prostředí. Ačkoliv se objevilo mnoho nových biomedicínských aplikací nanomateriálů, většina z nich se stále nachází ve fázi konceptu. Základní in vitro výzkum elementárních interakcí nanomateriálů s biologickým prostředím by tudíž měl být nezbytnou součástí jejich vývoje. Cílem této dizertační práce bylo popsat cytokompatibilitu a interakce dvou typů nanomateriálů s různými lidskými buňkami. Jako první byla testována vhodnost ultra-jemného titanu pro budoucí využití ve vývoji implantátů. Pozitivní efekt byl potvrzen především pro růst osteoblastů a materiál byl doporučen pro preklinické testování jako kostní či zubní implantát. Dále bylo popsáno několik druhů ultra-malých (˂ 5 nm) nanočástic o různém původu (křemík, zlato a platina) v různých podmínkách, abychom získali informace o jejich cytotoxicitě v závislosti na čase a koncentraci a také o jejich chování...
|
|
| |
host ::
RSS.