|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Cytochrome P450 oxidoreductase: Structurally functional study. Molecular pathology of Antley-Bixler syndrome.
Tomková, Mária ; Martásek, Pavel (vedoucí práce) ; Mazura, Ivan (oponent) ; Králová, Jarmila (oponent)
ABSTRAKTNADPH-P450 oxidoreduktáza (POR) je membránový flavoprotein, který transportuje elektrony na široké spektrum hemoproteinů, řada z nich hraje podstatnou úlohu v metabolizmu xenobiotik a steroidů. Vzhledem k nezastupitelné roli POR v metabolismu léků je v posledních letech pozorován zvýšený zájem o analýzu genu POR, zejména v oblasti farmakogenomiky. Mutace v genu POR způsobují onemocnění, které souborně nazýváme POR deficience. Toto onemocnění se projevuje širokým spektrem fenotypových projevů sahajících od poruch steroidogenéze až po kosterní malformace známé jako Antley-Bixlerův syndrom (ABS). Cílem předložené práce je analýza genu POR u pacientů s podezřením na POR deficienci a poprvé v běžné české a židovské populaci. Analyzovali jsme 644 alel nepříbuzných českých jedinců a 1128 alel v populaci židovské, 330 alel Aškenázů, 798 alel Sefardů. Následně byl studován vliv vybraných nových genetických variant na aktivitu POR proteinu. Definovali jsme frekvence alel genu POR v obou populacích, popsali jsme 14 nových variant vedoucích k aminokyselinovým záměnám POR proteinu a prozkoumali jsme dvě z nich s cílem určit jejich vliv na aktivitu proteinu. Dostupnost struktury lidské POR umožnila modelování nově popsaných variant a popis defektu na molekulární úrovni. Analýza genu POR byla následně v laboratoři...
|
|
| |
|
| |
|
|
Genetické příčiny MODY (Maturity-Onset Diabetes of the Young)- sledování prevalence mutací "MODY" genů v české populaci diabetiků a kontrol
Lukášová, Petra ; Bendlová, Běla (vedoucí práce) ; Gašperíková, Daniela (oponent) ; Mazura, Ivan (oponent)
14. SOUHRN A ZÁVĚR 103 14. SOUHRN A ZÁVĚR Stanovené cíle dizertační práce byly splněny: Byl sestaven soubor 12 rodin s neurčeným typem MODY a rozsáhlé soubory diabetiků 2. typu, potomků diabetiků 2. typu nepříbuzných s našimi DM2 pacienty, gestačních diabetiček a kontrolních jedinců, které byly podrobně biochemicky a antropometricky charakterizovány. Pro potřeby vyhodnocování a statistické analýzy byla vytvořena databáze získaných dat. Byla vytvořena DNA banka, která slouží ke studování polymorfismů a mutací v kandidátních genech. Pro všechny studované genetické lokusy byla zavedena metoda PCR. Metoda RFLP byla zavedena pro detekci polymorfismů -30G>A v B-promotoru GCK genu a A98V v HNF-1 genu. Metoda SSCP byla vzhledem k menší finanční náročnosti než RFLP analýza následně použita pro detekci polymorfismu -30G>A v B-promotoru GCK genu TGGE analýza byla zavedena pro exony 1a-7 GCK genu. Pro exony 8-10 se nám nepodařilo najít vhodné primery s GC-clampem, které jsou nezbytné pro použití TGGE metody. Pro identifikaci genových variant všech exonů specifických pro -buňky (1a-10) GCK genu byla zavedena metoda SSCP analýzy. Vzorky, které byly během TGGE a/nebo SSCP analýzy GCK genu shledány jako pozitivní, byly následně obousměrně sekvenovány. Potvrdili jsme vysokou senzitivitu obou screeningových metod - shoda v...
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.