|
| |
|
|
Nanofibrous scaffolds in controlled delivery of autologous growth factors
Buzgo, Matej ; Amler, Evžen (vedoucí práce) ; Gášková, Dana (oponent)
Preparáty z trombocytov sú zdrojom širkokého spektra autológnych rastových faktorov využite ných v tkanivovom inžinierstve. Cie om práce bolo vytvorenie nanovlákenného nosiča v kombinácii s preparátmi z trombocytov. Podarilo sa nám vytvori systém s frakciami trombocytov adhererovanými na nanovlákenný nosič. Systém stimuloval proliferáciu chondrocytov v podmienkach in vitro. Nevýhodou nosiča bolo rýchle počiatočné uvo nenie obsahu a následný pokles koncentrácie rastových faktorov spôsobujúcich krátkodobý pozitívny efekt. Pred ženie účinku bolo dosiahnuté inkorporáciou trombocytárnych preparátov do jadra koaxiálnych vláken. Pre tieto účely sme vytvorili nový derivát trombocytov - alfa granule. Nosič stimuloval proliferáciu chondrocytov a napomáhal udržiava stabilnú hladinu TGF- 1 po dobu 7 dní. Popri tom sa nám podarilo vytvori nový systém riadeného dodávania látok založený na inkorporácii intaktných lipozómov do koaxiálnych nanovláken. Porovnanie koaxiálneho systému s lipozómami, so systémami na báze koaxiálneho zvlák ovania bez lipozómov a zvlák ovania z blendu preukázalo zachovanie aktivity HRP v dvojnásobnej miere voči konkurenčným systémom. Výsledky pokusov jasne poukazujú na ve ký aplikačný potenciál nanovlákenných systémov s trombocytárnymi preparátmi a systémov s inkorporovanými lipozómami. K...
|
|
| |
|
|
Competition of cells within the population of yeast colony
Očková, Veronika ; Váchová, Libuše (vedoucí práce) ; Gášková, Dana (oponent)
Kompetícia je veľmi významný prírodný jav, pri ktorom dochádza k súpereniu organizmov v prípadoch, ako je obmedzenie priestoru či nedostatok živín. Nastáva hlavne v prípadoch keď organizmy, vrátane mikroorganizmov žijú v početných populáciách. K takýmto populáciám sa radia aj mnohobunkové kvasinkové kolónie, ktoré vytvára Saccharomyces cerevisiae. V okamihu, keď populácia kvasinkových buniek vyčerpá živiny z okolia, sú bunky v kolóniách schopné reagovať na tieto zmeny produkciou signálnych molekúl amoniaku. Vďaka jeho produkcii sú bunky schopné zmeniť svoju morfológiu a metabolizmus a v závislosti na umiestnení v kolónii vytvoriť subpopuláciu buniek so špecifickými vlastnosťami a rozdielnou funkciou. Je pravdepodobné, že v prípade zmiešaných kolónií tvorených dvoma kmeňmi, môže medzi bunkami týchto kmeňov dochádzať ku kompetičnej rivalite, a tým môže dôjsť k zmene pomeru buniek oboch kmeňov v populácii kolónie, takže nakoniec počet buniek jedného kmeňa preváži nad druhým. V tejto práci som porovnávala rast a vývoj gigantických kolónií a kompetíciu medzi bunkami vybraných dvojíc kmeňov tvoriacich takúto zmiešanú kolóniu. Vychádzala som z rodičovského kmeňa kvasinky S. cerevisiae BY a jeho variant značených fluorescenčnými proteínmi. Pre štúdium kompetície medzi rodičovským kmeňom a kmeňom neschopným...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Studium membránových transportních procesů u kvasinek pomocí potenciometrické fluorescenční sondy diS-C3(3)
Bartl, Tomáš ; Gášková, Dana (vedoucí práce) ; Krůšek, Jan (oponent)
Název práce: Studium membránových transportních procesů u kvasinek pomocí potenciometrické fluorescenční sondy diS-C3(3) Autor: Tomáš Bartl Katedra / Ústav: Fyzikální ústav UK Vedoucí bakalářské práce: doc. RNDr. Dana Gášková, CSc., Fyzikální ústav UK Abstrakt: V membránách kvasinek existuje celá řada transportérů. Některé jsou zodpovědné za přísun živin do buněk, jiné za vylučování odpadních a cizorodých látek ven z buněk nebo za transport malých anorganických iontů a protonů přes membránu. V této práci byla studována činnost specifických transportních proteinů, tzv. MDR pump, které jsou zodpovědné za odstraňování cizorodých látek/léků z buněk. Pomocí série mutantních kmenů kvasinek Saccharomyces cerevisiae (AD12, AD1-3 a AD1-8) lišících se zastoupením jednotlivých MDR pump v jejich plazmatické membráně byl zkoumán vliv různých chemických látek na změnu intracelulární koncentrace potenciometrické fluorescenční sondy diS-C3(3), která je aktivně odstraňována z buněk některými z těchto pump. Sledováním účinku glukózy a 2-deoxyglukózy byl prokázán aktivní příspěvek nejenom hlavní MDR pumpy, Pdr5p, ale také dalších pump ke snižování intracelulární koncentrace sondy. Bylo zjištěno, že zatímco glukóza zvyšuje aktivitu těchto pump při odstraňování sondy z cytosolu, přidání 2-deoxyglukózy způsobuje naopak jejich...
|
|
|
Funkcionalizovaný nanovlákenný systém pro urychlení regenerace vnitřních tkání
Kráľovič, Martin ; Amler, Evžen (vedoucí práce) ; Gášková, Dana (oponent) ; Chvojka, Jiří (oponent)
Funkcionalizací lze upravit vlastnosti nanovláken připravených elektrostatickým zvlákňováním aby se co nejlépe svou funkcí nahrazovali chybějící extracelulární matrix v hojící se ráně. U králičích střevních anastomózach se ukázala funkcionalizace nanovláken kryogenní frakcionalizací jako klíčová. Zatímco použití funkcionalizovaných PVA a chitosanových nanovláknných membrán vedlo ke strikturám střeva a silným zánětům, až další funkcionalizace PVA a chitosanových nanovláken jejich kryogenní frakcionalizací vedla k možnosti snížení dávky polymeru, což významně zredukovalo zánětlivou odpověď a podstatně zvýšilo biokompatibilitu použitého materiálu. Aplikací frakcionalizovaných nanovláken bylo dosaženo zvýšení podílu mikrocév, fibroblastů a kolagenu, což se projevilo na zvýšení biomechanické pevnosti zhojených anastomóz. Funkcionalizace polykaprolaktonových nanovláken speciálním přilepením k polypropylénové síťce je umožnilo požít jako podporu hojení fascie v břišní stěně prasat. Funkcionalizace PVA nanovláken glyoxalem vedla k jejich zvýšené stabilitě ve vodním prostředí. Aplikací membrány z PVA funkcionalizovaných nanovláken na hluboké rány v kůži králíků umožňuje výměnu dýchacích plynů mezi ránou a okolím, což podporuje proliferaci buněk a produkci kolagenu. Nanovlákenná membrána na kožní ráně tak...
|
|
|
Analýza uspořádaní vazebné kapsy MDR pumpy Cdr1p patogenní kvasinky Candida albicans - hlavního přispěvatele ke klinické lékové rezistenci
Bartl, Tomáš ; Gášková, Dana (vedoucí práce) ; Krůšek, Jan (oponent)
Název práce: Analýza uspořádaní vazebné kapsy MDR pumpy Cdr1p patogenní kvasinky Candida albicans - hlavního přispěvatele ke klinické lékové rezistenci Autor: Tomáš Bartl Katedra / Ústav: Fyzikální ústav UK Vedoucí diplomové práce: doc. RNDr. Dana Gášková, CSc., Fyzikální ústav UK Abstrakt: Kandidózové infekce jsou častou příčinou úmrtí hospitalizovaných pacientů. U nejvýznamnějšího kvasinkového patogenu, Candida albicans, je za jeho klinicky významnou rezistenci vůči používaným lékům (azolům) zodpovědná nadprodukce proteinů transportních pump, které léčivé látky odstraňují z buněk, a vzniká tak fenomén mnohačetné lékové rezistence - MDR. Cílem této práce bylo ověřit vhodnost použití kmenů kvasinky Saccharomyces cerevisiae využívajících heterologní expresi MDR pump z patogenní kvasinky Candida albicans, a na tomto systému potvrdit výsledky získané přímo na C. albicans s homologní expresí. Skutečnost, že azolová léčiva mikonazol, bifonazol a ketokonazol, a potenciometrická fluorescenční sonda diS-C3(3), jsou substráty pump CaCdr1p a CaCdr2p, ale nikoliv, nebo minimálně, pumpy CaMdr1p, tedy odpovídají dříve publikovaným výsledkům. Za pomoci jednak zónových testů, jednak diS-C3(3) fluorescenční metody, byla studována vazebná kapsa CaCdr1p s využitím strukturně podobných látek vorikonazolu, flukonazolu,...
|
host ::
RSS.