TY - THES TI - Analýza nestabilních komplexů pro studium enzymatické methylace arsenu TT - Analysis of unstable complexes for study of enzymatic methylation of arsenic AU - Albrecht, Michal AB - The main aim of this thesis was the development of conjugation of existing methods for analysis of arsenic-glutathione complexes (As-GS complexes) together with simple arsenic species (iAs, MMAs, DMAs) during simple run. The basic technique for analysis of As-GS complexes was the HPLC-ICP-MS method with a reverse phase separation column (C18). The separation problem of simple species has been overcome by extending of system by postcolumn hydride generation with cryotrapping system (HG-CT). The resulting HPLC/HG-CT-ICP-MS system provides a complex analysis of all the above-mentioned analytes. According to the currently available resources, it is an innovative system, where for the first time all the simple arsenic species (iAs, MMAs, DMAs) and the As-GS complexes were separated. Under the given conditions, the detection limit for the As-GS complexes of 1.9 pg cm-3 in the RP-HPLC-ICP-MS system (a quantification limit of 6.5 pg cm-3 ) was achieved at a sensitivity of 468 CPS s pg-1 . The HG-CT-ICP-MS system provided a detection limit for iAs of 1.2 pg cm-3 at a sensitivity of 1121 CPS s pg-1 , for MMAs of 0.043 pg cm-3 at a sensitivity of 895 CPS s pg-1 and for DMAs of 0.076 pg.cm-3 at a sensitivity of 926 CPS s pg-1 . This method was applied to achieve another aim, studying the pathways of enzymatic... AB - Hlavním cílem této diplomové práce byl vývoj metody pro kontinuální stanovení arsenoglutationových komplexů (As-GS komplexů) společně s jednoduchými speciemi arsenu během jedné analýzy. Základní technikou pro analýzy As-GS komplexů byla metoda HPLC-ICP-MS se separační kolonou s reverzní fází (C18). Problém se separací jednoduchých specií byl překonán rozšířením systému o postkolonové generování s kryogenním záchytem (HG-CT). Vzniklý systém HPLC/HG-CT-ICP-MS poskytuje množnost komplexní analýzy všech výše zmiňovaných analytů. Dle současně dostupných zdrojů jde o inovativní systém, na kterém vůbec poprvé došlo k separaci všech jednoduchých specií arsenu (iAs, MMAs, DMAs) společně s As-GS komplexy. Tato kombinace je velmi užitečná pro studium všech produktů enzymatické reakce během jedné analýzy. Za daných podmínek bylo dosaženo meze detekce pro As-GS komplexy 1,9 pg cm-3 v systému RP-HPLC-ICP-MS (mez stanovitelnosti 6,5 pg cm-3 ) při citlivosti 468 CPS s pg-1 . Systém HG-CT-ICP-MS poskytl mez detekce pro iAs 1,2 pg cm-3 při citlivosti 1121 CPS s pg-1 , pro MMAs 0,043 pg cm-3 při citlivosti 895 CPS s pg-1 a pro DMAs 0,076 pg cm-3 při citlivosti 926 CPS s pg-1 . Daná metoda byla aplikována pro dosažení dalšího z cílů, studium cesty enzymatické syntézy komplexů arsenu pomocí AS3MT za předem určených... UR - http://www.nusl.cz/ntk/nusl-405297 UR - http://hdl.handle.net/20.500.11956/108932 A2 - Červený, Václav A2 - Petry-Podgórska, Inga LA - cze KW - high performance liquid chromatography KW - arsenic-glutathione complexes KW - Arsen KW - inductively coupled plasma - mass spectrometry KW - generování hydridů s kryogenním záchytem KW - methylace arsenu KW - speciační analýza KW - arsenic methylation KW - vysokoúčinná kapalinová chromatografie KW - speciation analysis KW - hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem KW - Arsenic KW - hydride generation - cryotrapping KW - arsenoglutationové komplexy PY - 2019 PB - Univerzita Karlova, Ovocný trh 5, 116 36 Praha 1, http://cuni.cz/ ER -