Original title: Měření aktivace signálních drah v myší makrofágové linii IC-21 a primárních dendritických buňkách po infekci virem klíšťové encefalitidy.
Translated title: Measurement of signalling pathway activation in mouse macrophage line IC-21 and primery dendritic cells after infection with tick-borne encephalitis virus.
Authors: Kožantová, Jana ; Lieskovská, Jaroslava (advisor) ; Drbal, Karel (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2017
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Klíšťová encefalitida je závažným onemocněním centrální nervové soustavy. Je způsobena virem klíšťové encefalitidy, který je přenášen klíšťaty. Česká republika patří mezi země s největším výskytem této nemoci. Virus klíšťové encefalitidy je schopen se replikovat v několika buněčných typech. V práci jsme se zaměřili na makrofágovou linii IC-21 a dendritické buňky, protože jsou to jedny z prvních buněk přicházejících do kontaktu s virem a zároveň napomáhají šíření viru v hostiteli v počáteční fázi infekce. Dosud není znám specifický receptor pro vstup viru do buňky, ani které signální dráhy aktivuje. Proto jsme se rozhodli prozkoumat aktivaci vybraných signálních drah po infekci virem klíšťové encefalitidy a ovlivnění této aktivace klíštěcími slinami. K tomuto účelu byly využity metody duální luciferázové eseje, imunosendvičové eseje a western blotu. Ze získaných výsledků vyplývá, že ve virem infikovaných buňkách IC-21 se aktivuje fosfatidyl-inositolová dráha, NF-κB, signální molekula Erk1/2 a další. Testování vlivu klíštěcích slin ukázalo, že jejich účinkem dochází k signifikantnímu snížení aktivity signálních molekul NF-κB, AP-1 a CREB. Tick-borne encephalitis is a serious disease of the central nervous system. It is caused by tick-borne encephalitis virus, which is transmitted by ticks. The Czech Republic is one of the countries with the highest prevalence of this disease. Tick-borne encephalitis virus is able to replicate in several cell types. In this work we focused on macrophage line IC-21 and dendritic cells, because these cells are the first, which encounter the virus and support its spreading in the host at early stage of infection. So far there is not known any specific receptor for virus entry into cells or which signaling pathways activates. Therefore, we decided to investigate the activation of selected signaling pathways after infection with tick-borne encephalitis virus and influence of tick saliva on this activation. We employed methods of dual luciferase reporter assay, immunosandwich assay and western blot. The obtained results showed that in virus infected IC-21 cells are activated phosphatidyl-inositol pathway, NF-κB pathway, signaling molecule Erk1/2 and others. Testing of tick saliva effect revealed significantly decreased activity of NF-κB, AP-1 and CREB.
Keywords: dendritic cells; dual luciferase reporter assay; macrophage line IC-21; PathScan® Intracellular Signaling Array; signaling pathways; tick saliva; Tick-borne encephalitis; tick-borne encephalitis virus; western blot; dendritické buňky; duální luciferázová reportérová esej; klíštěcí sliny; Klíšťová encefalitida; makrofágová linie IC-21; PathScan® Intracellular Signaling Array; signální dráhy; virus klíšťové encefalitidy; western blot

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/91149

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-367677


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses