Název:
Proteiny jako zdroj dusíku pro rostliny tabáku pěstované in vitro
Překlad názvu:
Proteins as a source of nitrogen for tobacco plants grown in vitro
Autoři:
Bělonožníková, Kateřina ; Ryšlavá, Helena (vedoucí práce) ; Entlicher, Gustav (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2016
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Dusík (N) patří mezi nepostradatelné prvky pro růst a vývoj rostlin. Dříve byla pozornost soustředěna hlavně na jeho anorganické formy - dusičnany a amonné kationty. V půdě je N přítomen také v organické formě, kterou představují i proteiny, o které mohou rostliny soutěžit s půdními mikroorganismy. V současné době jsou zvažovány dva mechanismy - hydrolýza proteinů sekretovanými proteasami a endocytóza nativních proteinů, případně jejich souhra. Rostliny tabáku byly pěstovány in vitro za sterilních podmínek v modifikovaném Murashige- Skoogově médiu s kaseinem jako jediným zdrojem N (KAS), se sníženou koncentrací anorganických forem N (AD) nebo v kompletním Murashige-Skoogově médiu jako kontrolní rostliny (MS). Po 12 týdnech růstu byly změřeny standardní růstové parametry rostlin. KAS rostliny byly schopné růst bez přítomnosti anorganické formy N, a obsah proteinů v listech byl vyšší než v ostatních experimentálních rostlinách. Proteomická analýza ukázala rozdíly v expresi proteinů v kořenech rostlin v závislosti na formě N v kultivačním médiu. Celkově bylo identifikováno 185 proteinů, z nichž 75 % procent proteinů bylo méně a 14 % více abundantních v KAS rostlinách. Příjem konjugátu kaseinu s fluoresceinem rostlinami a jejich proteolytická aktivita byla analyzována konfokální mikroskopií. Mezi...Nitrogen (N) belongs among necessary elements for plant growth and development. In the past attention was paid mostly to the inorganic forms - nitrate and ammonium. In soil N is also present in organic forms, including proteins, for which plants could compete with soil microorganisms. Recently two ways have been considered - the hydrolysis of proteins by secreted proteases and endocytosis of native proteins, possibly their confluence. Tobacco plants were grown in vitro under sterile conditions in modified Murashige-Skoog medium with casein as the only source of N (CAS), decreased concentration of inorganic forms of N (AD) or in complete Murashige-Skoog medium as control plants (MS). After the 12 weeks growth, the standard growth parameters were measured. The CAS plants were able to grow without inorganic N, and protein content in the leaves was higher than in other experimental plants. Proteomic analysis documented differences in protein expression in plant roots in the dependence on the form of N. In total 185 proteins were identified, 75% of proteins were less and 14% more abundant in the CAS plants. The uptake of casein conjugated with fluorescein was followed and the proteolytic activity was analyzed by confocal microscopy. Among proteins secreted from roots to the medium aspartic protease...
Klíčová slova:
dusík; in vitro; protein; tabák; in vitro; nitrogen; protein; tobacco