Název:
NMDA receptory u astrocytů: jejich funkce v ischemicky poškozené nervové tkáni
Překlad názvu:
NMDA receptors in astrocytes: their role in ischemic brain injury
Autoři:
Valný, Martin ; Anděrová, Miroslava (vedoucí práce) ; Hock, Miroslav (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2013
Jazyk:
eng
Abstrakt: [eng][cze] Glutamate is the main excitatory neurotransmitter in the mammalian brain, and its transmission is responsible for higher brain functions, such as learning, memory and cognition. Glutamate action is mediated by variety of glutamate receptors, of which N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors are the most remarkable due to their high Ca2+ permeability and complex pharmacology. Despite the widespread expression of NMDA receptors in astroglial cells in different brain regions, they have been studied mostly in neurons. Therefore, the role of astroglial NMDA receptors under physiological conditions as well as in pathological states, such as cerebral ischemia, is not fully understood. The aim of this work was to elucidate the presence, composition and function of these receptors in astrocytes under physiological conditions and after focal cerebral ischemia. For this purpose, we used transgenic (GFAP/EGFP) mice, in which astrocytes express enhanced green fluorescent protein (EGFP) under the control of human promotor for glial fibrillary acidic protein (GFAP) enabling astrocyte isolation and their collection via fluorescence-activated cell sorting. We performed single-cell RT-qPCR analysis of astrocytes isolated from the cortex of adult mice. The analyzed cells were isolated from the uninjured brains of 50...Glutamát je hlavní excitační neuropřenašeč v mozku savců a je zodpovědný za vyšší mozkové funkce jako jsou učení, paměť či kognice. Účinek glutamátu je zprostředkován různými typy glutamátových receptorů, z nichž nejvíce pozornosti poutají N-methyl-D-aspartát (NMDA) receptory disponující vysokou propustností pro vápník a složitou farmakologií. Navzdory tomu, že jsou NMDA receptory hojně exprimovány v astrocytech různých oblastí mozku, doposud byly studovány především ve spojitosti s neuronální aktivitou, což je důvod, proč jejich úloha jak ve zdravém, tak i v poškozeném mozku zůstává neobjasněna. Cílem této práce bylo studovat NMDA receptory v astrocytech za fyziologických podmínek a identifikovat změny v jejich složení a funkci po fokální mozkové ischemii. Za tímto účelem byly použity transgenní myši (GFAP/EGFP), u kterých jsou astrocyty označeny zeleným fluorescenčním proteinem (EGFP), který je exprimován pod lidským promotorem pro gliální fibrilární acidický protein (GFAP). Použití těchto myší umožnilo izolaci EGFP-pozitivních astrocytů pomocí fluorescenční průtokové cytometrie. Byla provedena RT-qPCR analýza jednotlivých astrocytů, které byly izolovány z mozkové kůry neporaněných, 50 dní starých myší (kontrola) a myší 3, 7 a 14 dní po okluzi střední mozkové tepny, model fokální mozkové...
host ::
